നോവൽ ഇൻ വിട്രോ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് മെറ്റബോളിസം മോഡൽ മന്ദഗതിയിലാക്കുന്നു-മെറ്റബോളിസിംഗ് ഫാർമക്കോകൈനറ്റിക് പഠനങ്ങൾ

ഇൻ വിട്രോ ഇൻകുബേഷൻ സമയം നീട്ടുന്നതിനനുസരിച്ച് മയക്കുമരുന്ന് രാസവിനിമയ എൻസൈം പ്രവർത്തനങ്ങൾ ക്രമേണ കുറയുന്നതിനാൽ, പരമ്പരാഗത ഇൻ വിട്രോ മെറ്റബോളിസം മോഡലുകൾക്ക് ഹ്രസ്വ ഇൻകുബേഷൻ സമയം, കുറഞ്ഞ ഉപാപചയ പരിവർത്തനം, കണ്ടെത്തലിൻ്റെ ഉയർന്ന താഴ്ന്ന പരിധി എന്നിങ്ങനെയുള്ള പരിമിതികളുണ്ട് (ക്ലിൻ്റ് അസേയുടെ അളവ് കുറഞ്ഞ പരിധി 2.5 μL /(മിനിറ്റ് 106) കോശങ്ങളിൽ മെല്ലെ പ്രവചിക്കാൻ കഴിയില്ല. മയക്കുമരുന്ന്^[1]. അതേസമയം,ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്ഓക്സീകരണം, കുറയ്ക്കൽ, ജലവിശ്ലേഷണം, ഡൈമറൈസേഷൻ പ്രതികരണങ്ങൾ എന്നിവയ്ക്ക് ആവശ്യമായ കൂടുതൽ എൻസൈമുകൾ ഇവയിലുണ്ട്.കരൾ മൈക്രോസോമുകൾ, ഇൻ വിട്രോ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ, പല പുതിയ മോഡലുകളും ഇതിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യപ്പെടാറുണ്ട്ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ് സിസ്റ്റത്തിൽ എൻസൈം പ്രവർത്തനം നിലനിർത്തുന്നത് ദീർഘിപ്പിക്കുന്നതിന് ഇൻ വിവോ പരിതസ്ഥിതിയെ അനുകരിക്കുകഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്s, കൂടാതെ ഇൻകുബേഷൻ സമയം നീട്ടുന്നത് മന്ദഗതിയിലുള്ള മെറ്റബോളിസിംഗ് മരുന്നുകളുടെ മതിയായ ഉപാപചയ പരിവർത്തനം നിരീക്ഷിക്കാനുള്ള സാധ്യത നൽകുന്നു.^[1,2].

ഇത് കണക്കിലെടുത്ത്, ഇൻ വിട്രോ ഗവേഷണത്തിനുള്ള ബയോളജിക്കൽ റിയാജൻ്റുകളുടെ ഒരു മുൻനിരയിലുള്ള ഐപിഎഎസ്ഇ, മനുഷ്യൻ, കുരങ്ങ്, നായ്, എലി, എലി, സിസ്റ്റം™C, സിസ്റ്റം™C, സിസ്റ്റം™C, സിസ്റ്റം™C, സിസ്റ്റം™C മുതലായ വിവിധ ജനുസ്സുകളിൽ പെട്ട പ്രാഥമിക ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെയും സ്‌ട്രോമൽ കോശങ്ങളുടെയും പഠനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി HepatoMax™ സിസ്റ്റം, HepatoCon™ മീഡിയ സിസ്റ്റം എന്നിവയ്ക്ക് തുടക്കമിട്ടു. പിന്തുടരുന്ന പ്രാഥമിക മനുഷ്യനെ ഉപയോഗിച്ച് വികസിപ്പിച്ചെടുത്തുഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്ഒരു ഉദാഹരണമായി, രണ്ട് സിസ്റ്റങ്ങളും നിർദ്ദിഷ്ട എൻസൈമുകളുടെ പ്രവർത്തനവും ഉപാപചയ സ്ഥിരതയും നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനും സിസ്റ്റങ്ങൾ പരിശോധിക്കുന്നതിനായി 10 ദിവസത്തിലും 7 ദിവസത്തിലും ടോൾബുട്ടാമൈഡ് മരുന്നിൻ്റെ മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെ പ്രതികരണ മൂല്യം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും സജ്ജമാക്കി. 10 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ മെറ്റാബോലൈറ്റ് വർദ്ധനവ് പ്രതികരണ മൂല്യവും 7 ദിവസങ്ങളിൽ നിർദ്ദിഷ്ട എൻസൈം തരങ്ങളുടെ പ്രവർത്തനവും ഉപാപചയ സ്ഥിരതയും സിസ്റ്റങ്ങളെ സാധൂകരിക്കാൻ നിർണ്ണയിച്ചു.

• (1) രണ്ട് ചിട്ടയായ മയക്കുമരുന്ന് മൂല്യനിർണ്ണയ സംസ്‌കാര പ്രക്രിയകൾ ഇനിപ്പറയുന്നവയാണ്:

  IPHASE-HepatoMax™ശീതീകരിച്ച മതിലുകളുള്ള പ്രാഥമിക മനുഷ്യ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളുടെയും സ്ട്രോമൽ കോശങ്ങളുടെയും ഒരു സഹ-സംസ്കാര സംവിധാനമാണ്. പ്രാഥമിക മനുഷ്യ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ പുനരുജ്ജീവിപ്പിക്കുകയും ഹെപ്പറ്റോപി™ മീഡിയത്തിലെ സ്ട്രോമൽ സെല്ലുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും 3 ദിവസത്തേക്ക് ഡ്രഗ് അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ അസ്സെ ആരംഭിക്കുകയും ചെയ്തു, കൂടാതെ മരുന്നിൻ്റെ മെറ്റബോളിസം സെറം-സ്വതന്ത്ര ഹെപ്പറ്റോഡോ™ മീഡിയത്തിൽ നടത്തി, അത് മീഡിയം മാറ്റാതെ മരുന്ന് ഉപയോഗിച്ച് മാത്രം നിറച്ചു. മയക്കുമരുന്ന് അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ കഴിഞ്ഞ് 4, 72, 168, 240 മണിക്കൂറുകൾക്ക് ശേഷം, വിശകലനത്തിനായി മയക്കുമരുന്ന് മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെ മൂല്യവർദ്ധിത മൂല്യം നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു.

 

  IPHASE-HepatoCon™മറുവശത്ത്, HepatoCon™ മാധ്യമത്തിൽ ശീതീകരിച്ച അഡ്‌ഡറൻ്റ് പ്രൈമറി ഹ്യൂമൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ സംസ്‌കരിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു സംവിധാനമാണ്. പ്രാഥമിക മനുഷ്യനെ പുനരുജ്ജീവിപ്പിച്ച ശേഷംഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്s, ഹെപ്പറ്റോകോൺ™ മീഡിയത്തിൽ മാത്രം 3 ദിവസത്തെ സംസ്കാരത്തിന് ശേഷം ഡ്രഗ് അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ പരിശോധന നടത്തി, തുടർന്നുള്ള അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ സമയവും സംസ്കാര സമ്പ്രദായവും വിശകലന രീതിയും ഹെപ്പറ്റോമാക്സ്™ സിസ്റ്റത്തിന് തുല്യമായിരുന്നു.

 

അതേസമയം, ഫലങ്ങളുടെ കൃത്യതയും കാഠിന്യവും ഉറപ്പാക്കാൻ, IPHASE ഒരേ സമയം ഒരു മീഡിയം കൺട്രോളും (സെൽ-ഫ്രീ) ഒരു സ്ട്രോമൽ സെൽ നിയന്ത്രണവും മൂന്ന് പകർപ്പുകളോടെ നടത്തി, ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത്IPHASE-HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE-HepatoCon™ സിസ്റ്റങ്ങൾ 3 ദിവസം മുതൽ ശക്തമായ പീക്ക് മെറ്റാബോലൈറ്റ് പ്രതികരണം ഉണ്ടാക്കി, അവ രണ്ടും ശക്തമായ ഉപാപചയ വിറ്റുവരവ് നിരക്ക് കാണിച്ചു.

 

 

• (2) മരുന്നുകളുടെ രാസവിനിമയം പ്രധാനമായും ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നുCYP450എൻസൈം സിസ്റ്റം, അതിൻ്റെ പ്രവർത്തനം നന്നായി പരിശോധിക്കാൻ അളക്കാൻ കഴിയും.

ദിIPHASE-HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE-HepatoCon™ സിസ്റ്റങ്ങൾക്ക് നല്ല പ്രയോഗക്ഷമതയുണ്ട്.

മീഡിയം കൺട്രോൾ (സെല്ലുകൾ ഇല്ല), HepatoMax™, HepatoCon™, സ്ട്രോമൽ സെല്ലുകൾ എന്നിവയുടെ നാല് വിഭാഗങ്ങൾ IPHASE സജ്ജമാക്കി. മതിൽ-അനുബന്ധ പ്രാഥമിക മനുഷ്യനെ ഉപയോഗിക്കുന്നുഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്ഒരു ഉദാഹരണമായി, മെറ്റാബോലൈറ്റ് മൂല്യങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നുCYP1A2, CYP2B6ഒപ്പംCYP3A40, 3, 7 ദിവസങ്ങളിൽ പരിശോധിച്ചുറപ്പിച്ചുഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്യഥാക്രമം ഫിനാസ്റ്ററൈഡ്, ബുപ്രോപിയോൺ, മിഡസോലം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് 3 ദിവസത്തേക്ക് വീണ്ടെടുക്കൽ. മെറ്റാബോലൈറ്റ് വർദ്ധനവ് മൂല്യങ്ങൾ രണ്ടും കാണിച്ചുIPHASE-HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE-HepatoCon™ സിസ്റ്റങ്ങൾ 7-ാം ദിവസം സജീവമായ എൻസൈം പ്രവർത്തനം കാണിച്ചു, സാധാരണ മയക്കുമരുന്ന് മെറ്റബോളിസത്തെ സ്ഥിരമായി പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു.

 

• (3) എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ മൂല്യനിർണ്ണയത്തിനു പുറമേ, നല്ല ഉപാപചയ സ്ഥിരതയും ഇൻ വിട്രോ മോഡലുകളുടെ ഉപയോഗത്തെ സാധൂകരിക്കുന്നതിൽ പ്രധാനപ്പെട്ടതും ഒഴിച്ചുകൂടാനാവാത്തതുമായ ഒരു ഘട്ടമാണ്.

പ്രാഥമിക ഹ്യൂമൻ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ച് 80 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ ടോൾബുട്ടിമൈഡിൻ്റെ ഉപാപചയ സ്ഥിരത നിർണ്ണയിക്കാൻ ഹെപ്പറ്റോമാക്സ്™, ഹെപ്പറ്റോകോൺ™, സ്ട്രോമൽ സെല്ലുകൾ എന്നിവയുടെ മൂന്ന് വിഭാഗങ്ങൾ IPHASE സജ്ജമാക്കി.ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്s, ഫലങ്ങൾ രണ്ടും കാണിച്ചുIPHASE-HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE-HepatoCon™ രണ്ട് സിസ്റ്റങ്ങളും വിശകലന സമയത്തിൻ്റെ ഏറ്റവും ദൈർഘ്യമേറിയ മൂല്യത്തിനുള്ളിൽ ശക്തമായ ഉപാപചയ ക്ലിയറൻസ് പ്രവർത്തനം കാണിച്ചു.

 

ചുരുക്കത്തിൽ, IPHASE, ഇൻ വിട്രോ ബയോ-റിയാജൻ്റുകളിൽ ഒരു ലീഡർ എന്ന നിലയിൽ വികസിച്ചുIPHASE HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE HepatoCon™ മതിൽ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഇൻ വിട്രോ മോഡലുകൾ-പ്രൈമറി ഹ്യൂമൻ, കുരങ്ങ്, നായ, എലി, എലി എന്നിവ പ്രയോഗിക്കുന്നുഹെപ്പറ്റോസൈറ്റ്മികച്ച ഉപാപചയ വിറ്റുവരവ്, സജീവമായ എൻസൈം പ്രവർത്തനങ്ങൾ, ശക്തമായ ഉപാപചയ ക്ലിയറൻസ് പ്രവർത്തനങ്ങൾ എന്നിവയുള്ള വിവിധ ജനുസ്സുകളുടെ s, സ്ട്രോമൽ സെല്ലുകൾ, ഞങ്ങളുടെ ഉപഭോക്താക്കൾക്ക് കുറഞ്ഞ-ക്ലിയറൻസ് മരുന്നുകൾ വികസിപ്പിക്കുന്നതിന് പുതിയ ചോയിസുകൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു, കൂടാതെ മയക്കുമരുന്ന് കണ്ടെത്തൽ സാക്ഷാത്കരിക്കുന്നതിന് ഒഴിച്ചുകൂടാനാവാത്ത പങ്കാളിയുമാണ്! ദിIPHASE HepatoMax™ ഒപ്പംIPHASE HepatoCon™ ഇൻ വിട്രോ മോഡലുകൾ മികച്ച ഉപാപചയ വിറ്റുവരവ് നിരക്കുകൾ, സജീവ എൻസൈം പ്രവർത്തനങ്ങൾ, ശക്തമായ ഉപാപചയ ക്ലിയറൻസ് പ്രവർത്തനങ്ങൾ എന്നിവ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു, ഉപഭോക്താക്കൾക്ക് കുറഞ്ഞ-ക്ലിയറൻസ് മരുന്നുകൾ വികസിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള പുതിയ ഓപ്ഷനുകൾ നൽകുന്നു, കൂടാതെ മയക്കുമരുന്ന് കണ്ടെത്തലിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്കാളിയുമാണ്!

 

റഫറൻസ്:

[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[ജെ]. 2019(2):152-160.

[2] ഡി എൽ, ട്രാപ പി, ഒബാച്ച് ആർ എസ്, തുടങ്ങിയവർ. കുറഞ്ഞ-ക്ലിയറൻസ് മൂല്യങ്ങൾ[J] നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു നോവൽ റിലേ രീതി. ഡ്രഗ് മെറ്റബോളിസവും ഡിസ്പോസിഷനും, 2012, 40(9): 1860-1865.