Memandangkan aktiviti enzim memetabolismekan ubat secara beransur-ansur berkurangan dengan pemanjangan masa inkubasi in vitro, model metabolisme in vitro tradisional mempunyai had seperti masa inkubasi yang singkat, penukaran metabolik yang rendah dan had pengesanan yang lebih rendah yang tinggi (had kuantitatif ujian CLint yang lebih rendah ialah 2.5 μL /(min·106 sel)), yang tidak dapat meramalkan CLint ubat secara perlahan-lahan.[1]. Sementara itu,hepatosits mempunyai lebih banyak enzim yang diperlukan untuk tindak balas pengoksidaan, pengurangan, hidrolisis dan dimerisasi berbanding denganmikrosom hati, dan sistem in vitro, banyak model novel cenderung untuk dioptimumkan berdasarkanhepatosit sistem dan seterusnya meniru persekitaran in vivo untuk memanjangkan pengekalan aktiviti enzim dalamhepatosits, dan pemanjangan masa inkubasi memberikan kemungkinan untuk memantau transformasi metabolik yang mencukupi bagi ubat-ubatan metabolisme perlahan[1,2].
Memandangkan perkara ini, IPHASE, sebagai peneraju dalam reagen biologi untuk penyelidikan in vitro, telah mempelopori Sistem HepatoMax™ dan Sistem Media HepatoCon™ berdasarkan kajian tentang hepatosit primer yang melekat dan sel stroma pelbagai genera, termasuk manusia, monyet, taring, tikus, dan tetikus, dsb.hepatosits sebagai contoh, dan kedua-dua sistem telah ditubuhkan untuk penentuan aktiviti dan kestabilan metabolik jenis enzim tertentu dan peningkatan nilai tindak balas metabolit ubat tolbutamide pada 10 hari dan 7 hari untuk mengesahkan sistem. Metabolit meningkatkan nilai tindak balas pada 10 hari dan aktiviti dan kestabilan metabolik jenis enzim tertentu pada 7 hari telah ditentukan untuk mengesahkan sistem.
- (1) Dua proses kultur pengesahan ubat yang sistematik adalah seperti berikut:
IPHASE-HepatoMax™ialah sistem kultur bersama hepatosit dan sel stromal manusia berdinding beku. Hepatosit manusia utama telah dihidupkan semula dan diinkubasi dengan sel stromal dalam medium HepatoP™ selama 3 hari untuk memulakan ujian pentadbiran ubat, dan metabolisme ubat telah dijalankan dalam medium HepatoDo™ serum-percuma, yang hanya diisi semula dengan ubat tanpa mengubah medium. Sebanyak 4, 72, 168 dan 240 jam selepas pentadbiran ubat, nilai tambah metabolit ubat ditentukan untuk analisis.
IPHASE-HepatoCon™, sebaliknya, ialah sistem untuk mengkultur hepatosit primer manusia yang melekat beku dalam medium HepatoCon™. Selepas menghidupkan semula manusia utamahepatosits, ujian pentadbiran ubat dilakukan selepas 3 hari kultur dalam medium HepatoCon™ sahaja, dan masa pentadbiran berikutnya, sistem kultur dan metodologi ujian adalah sama seperti sistem HepatoMax™.
Sementara itu, untuk memastikan ketepatan dan ketelitian keputusan, IPHASE melakukan kawalan sederhana (sel-bebas) dan kawalan sel stroma pada masa yang sama, dengan tiga ulangan, dan keputusan menunjukkan bahawaIPHASE-HepatoMax™ danIPHASE-HepatoCon™ sistem menghasilkan tindak balas metabolit puncak yang kuat dari hari ke-3 dan seterusnya, dan kedua-duanya menunjukkan kadar pusing ganti metabolik yang kuat.
- (2) Metabolisme dadah terutamanya bergantung kepada hepatositCYP450sistem enzim, dan aktivitinya boleh diukur untuk pemeriksaan yang lebih baik.
TheIPHASE-HepatoMax™ danIPHASE-HepatoCon™ sistem mempunyai kebolehgunaan yang baik.
IPHASE menyediakan empat kategori kawalan sederhana (tiada sel), HepatoMax™, HepatoCon™ dan sel stromal. Menggunakan manusia primer yang berpegang pada dindinghepatosits sebagai contoh, metabolit meningkatkan nilaiCYP1A2, CYP2B6danCYP3A4telah disahkan pada hari 0, 3 dan 7 selepashepatositpemulihan selama 3 hari menggunakan finasteride, bupropion dan midazolam sebagai substrat, masing-masing. Nilai peningkatan metabolit menunjukkan bahawa kedua-duanyaIPHASE-HepatoMax™ danIPHASE-HepatoCon™ sistem menunjukkan aktiviti enzim aktif pada hari ke-7, secara konsisten menggalakkan metabolisme ubat normal.
- (3) Sebagai tambahan kepada pengesahan aktiviti enzim, kestabilan metabolik yang baik juga merupakan langkah penting dan amat diperlukan dalam mengesahkan kegunaan model in vitro.
IPHASE menyediakan tiga kategori HepatoMax™, HepatoCon™ dan sel stromal untuk menentukan kestabilan metabolik Tolbutimide dalam tempoh 80 jam menggunakan hepatosit manusia primer yang melekat sebagai contoh, yang diberikan 3 hari selepas resusitasi primer.hepatosits, dan keputusan menunjukkan bahawa kedua-duaIPHASE-HepatoMax™ danIPHASE-HepatoCon™ sistem kedua-duanya menunjukkan aktiviti pelepasan metabolik yang teguh dalam nilai terpanjang masa ujian.
Secara ringkasnya, IPHASE, sebagai peneraju dalam in vitro bio-reagens, telah berkembangIPHASE HepatoMax™ danIPHASE HepatoCon™ model in vitro berdasarkan dinding-guna utama manusia, monyet, taring, tikus dan tikushepatosits dan sel stroma pelbagai genera, dengan perolehan metabolik yang sangat baik, aktiviti enzim aktif dan aktiviti pembersihan metabolik yang kuat, yang menawarkan pilihan baharu untuk pelanggan kami untuk membangunkan ubat pelepasan rendah, dan merupakan rakan kongsi yang sangat diperlukan untuk merealisasikan penemuan dadah! TheIPHASE HepatoMax™ danIPHASE HepatoCon™ model in vitro menawarkan kadar pusing ganti metabolik yang sangat baik, aktiviti enzim aktif dan aktiviti pelepasan metabolik yang kuat, menyediakan pilihan baharu untuk pelanggan membangunkan ubat pelepasan rendah, dan merupakan rakan kongsi penting dalam penemuan dadah!
Rujukan:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Kaedah geganti baru untuk menentukan nilai kelegaan rendah[J]. Metabolisme dan pelupusan ubat, 2012, 40(9): 1860-1865.
Masa siaran: 2024-07-19 17:20:41