Peress li l-attivitajiet tal-enzimi li jimmetabolizzaw il-mediċina jonqsu gradwalment bit-titwil tal-ħin ta 'inkubazzjoni in vitro, mudelli tradizzjonali ta' metaboliżmu in vitro għandhom limitazzjonijiet bħal żmien qasir ta 'inkubazzjoni, konverżjoni metabolika baxxa u limitu baxx għoli ta' skoperta (il-limitu aktar baxx kwantitattiv tal-assaġġ CLint huwa 2.5 μL / (min · 106 ċelluli)), li ma jistgħux ibassru b'mod preċiż CLint ta 'drogi metabolizzati bil-mod.[1]. Sadanittant,epatoċitis għandhom aktar enzimi meħtieġa għal reazzjonijiet ta 'ossidazzjoni, tnaqqis, idroliżi u dimerizzazzjoni meta mqabbla ma'mikrosomi tal-fwied, u fis-sistemi in vitro, ħafna mudelli ġodda għandhom it-tendenza li jiġu ottimizzati bbażati fuq il-epatoċiti sistema u aktar jimitaw l-ambjent in vivo biex itawlu ż-żamma ta ' l-attività ta ' l-enżimi filepatoċitis, u t-titwil tal-ħin ta 'inkubazzjoni jipprovdi l-possibbiltà li tissorvelja trasformazzjoni metabolika suffiċjenti ta' drogi li jimmetabolizzaw bil-mod[1,2].
Fid-dawl ta’ dan, IPHASE, bħala mexxej fir-reaġenti bijoloġiċi għar-riċerka in vitro, kien pijunier fis-Sistema HepatoMax™ u s-Sistema tal-Media HepatoCon™ ibbażata fuq l-istudju ta’ epatoċiti primarji aderenti u ċelloli stromali ta’ diversi ġeneri, inklużi umani, xadini, klieb, far, u ġrieden, eċċ.epatoċitis bħala eżempju, u ż-żewġ sistemi ġew stabbiliti għad-determinazzjoni tal-attività u l-istabbiltà metabolika ta 'tipi speċifiċi ta' enzimi u ż-żieda fil-valur tar-rispons tal-metaboliti tal-mediċina tolbutamide f'10 ijiem u 7 ijiem biex tivverifika s-sistemi. Il-valur tar-rispons iżid il-metabolit f'10 ijiem u l-attività u l-istabbiltà metabolika ta 'tipi speċifiċi ta' enzimi f'7 ijiem ġew determinati biex jivvalidaw is-sistemi.
- (1) Iż-żewġ proċessi sistematiċi tal-kultura tal-validazzjoni tad-droga huma kif ġej:
IPHASE-HepatoMax™hija sistema ta' ko-kultura ta' epatoċiti umani primarji u ċelloli stromali ffriżati. L-epatoċiti umani primarji ġew risuxxitati u inkubati b'ċelluli stromali f'medju HepatoP™ għal 3 ijiem biex jinbeda l-assaġġ ta 'l-amministrazzjoni tad-droga, u l-metaboliżmu tal-mediċina twettaq fis-serum-medju HepatoDo™ ħieles, li ġie mimli mill-ġdid biss bil-mediċina mingħajr ma jinbidel il-mezz. Total ta '4, 72, 168 u 240 siegħa wara l-amministrazzjoni tal-mediċina, il-valur miżjud tal-metaboliti tad-droga ġie ddeterminat għall-analiżi.
IPHASE-HepatoCon™, min-naħa l-oħra, hija sistema għall-kultivazzjoni ta 'epatoċiti umani primarji aderenti ffriżati fil-medju HepatoCon™. Wara resuscitating-bniedem primarjuepatoċitis, l-analiżi tal-amministrazzjoni tad-droga twettqet wara 3 ijiem ta 'kultura fil-medju HepatoCon™ waħdu, u l-ħin sussegwenti tal-amministrazzjoni, is-sistema tal-kultura u l-metodoloġija tal-analiżi kienu l-istess bħal dawk tas-sistema HepatoMax™.
Sadanittant, biex tiżgura l-eżattezza u r-rigorożità tar-riżultati, IPHASE wettaq kontroll medju (ċellula - ħielsa) u kontroll taċ-ċelluli stromali fl-istess ħin, bi tliet repliki, u r-riżultati wrew li l-IPHASE-HepatoMax™ uIPHASE-HepatoCon™ sistemi pproduċew rispons qawwi tal-metabolit massimu mit-3 jum 'il quddiem, u li t-tnejn urew rata ta' turnover metabolika qawwija.
- (2) Il-metaboliżmu tad-droga huwa prinċipalment dipendenti fuq l-epatoċiteCYP450sistema ta 'enżimi, u l-attività tagħha tista' titkejjel biex teżamina aħjar.
Il-IPHASE-HepatoMax™ uIPHASE-HepatoCon™ is-sistemi għandhom applikabilità tajba.
IPHASE waqqaf erba' kategoriji ta' kontroll medju (l-ebda ċelluli), HepatoMax™, HepatoCon™ u ċelluli stromali. Bl-użu tal-ħajt-bniedem primarju aderentiepatoċitis bħala eżempju, il-metabolit iżidu l-valuri ta 'CYP1A2, CYP2B6uCYP3A4ġew verifikati fil-jum 0, 3 u 7 waraepatoċitiirkupru għal 3 ijiem bl-użu ta' finasteride, bupropion u midazolam bħala sottostrati, rispettivament. Il-valuri taż-żieda tal-metaboliti wrew li t-tnejnIPHASE-HepatoMax™ uIPHASE-HepatoCon™ sistemi wrew attività ta 'enżima attiva sa jum 7, b'mod konsistenti jippromwovu metaboliżmu normali tad-droga.
- (3) Minbarra l-validazzjoni tal-attività tal-enżimi, stabbiltà metabolika tajba hija wkoll pass importanti u indispensabbli fil-validazzjoni tal-utilità ta 'mudelli in vitro.
IPHASE waqqaf tliet kategoriji ta’ HepatoMax™, HepatoCon™ u ċelluli stromali biex tiddetermina l-istabbiltà metabolika ta’ Tolbutimide fuq perjodu ta’ 80 siegħa bl-użu ta’ epatoċiti umani primarji aderenti bħala eżempju, li ngħataw 3 ijiem wara r-risuxxitazzjoni primarja.epatoċitis, u r-riżultati wrew li kemm il-IPHASE-HepatoMax™ uIPHASE-HepatoCon™ sistemi t-tnejn urew attività ta 'tneħħija metabolika robusta fl-itwal valur tal-ħin tal-assaġġ.
Fil-qosor, IPHASE, bħala mexxej fil-bijo-reaġenti in vitro, żviluppatIPHASE HepatoMax™ uIPHASE HepatoCon™ mudelli in vitro bbażati fuq il-ħajt-uman primarju applikat, xadina, klieb, far u ġurdienepatoċitis u ċelluli stromali ta 'diversi ġeneri, b'fatturat metaboliku eċċellenti, attivitajiet ta' enzimi attivi u attivitajiet ta 'tneħħija metabolika qawwija, li joffru għażliet ġodda għall-klijenti tagħna biex jiżviluppaw drogi baxxi-clearance, u huma sieħeb indispensabbli biex jiġu realizzati l-iskoperta tad-droga! Il-IPHASE HepatoMax™ uIPHASE HepatoCon™ mudelli in vitro joffru rati ta 'fatturat metaboliku eċċellenti, attivitajiet ta' enzimi attivi u attivitajiet ta 'tneħħija metabolika qawwija, li jipprovdu għażliet ġodda għall-klijenti biex jiżviluppaw drogi ta' tneħħija baxxa-, u huma sieħeb importanti fl-iskoperta tad-droga!
Referenza:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Metodu ta' relay ġdid għad-determinazzjoni ta' valuri ta' clearance baxxi[J]. Metaboliżmu u dispożizzjoni tad-droga, 2012, 40(9): 1860-1865.
Ħin tal-post: 2024-07-19 17:20:41