Sûnt de medisinen metabolisearjende enzymaktiviteiten stadichoan ôfnimme mei de ferlinging fan in vitro-ynkubaasjetiid, hawwe tradisjonele in vitro-metabolismemodellen beheiningen lykas koarte ynkubaasjetiid, lege metabolike konverzje en hege legere limyt fan deteksje (de kwantitative legere limyt fan CLint-assay is 2.5 μL / (min · 106 sellen)), dy't net presys kinne foarsizze CLint fan stadich metabolisearre medisinen.[1]. Yntusken,hepatocytes hawwe mear enzymen nedich foar oksidaasje, reduksje, hydrolyse en dimerization reaksjes ferlike meilever mikrosomes, en yn in vitro systemen, in protte roman modellen tend to wurde optimalisearre basearre op dehepatocyte systeem en mimearje de in vivo-omjouwing fierder om it behâld fan enzymaktiviteit yn te ferlingjenhepatocytes, en de ferlinging fan 'e ynkubaasjetiid jout de mooglikheid om foldwaande metabolike transformaasje fan trage metabolisearjende medisinen te kontrolearjen[1,2].
Mei it each op dit hat IPHASE, as lieder yn biologyske reagentia foar in vitro ûndersyk, pionier makke yn it HepatoMax™ System en HepatoCon™ Media System basearre op 'e stúdzje fan oanhingjende primêre hepatocytes en stromale sellen fan ferskate genera, ynklusyf minske, aap, hûn, rat, en mûs, ensfh.hepatocytes as foarbyld, en beide systemen waarden ynsteld foar de bepaling fan de aktiviteit en metabolic stabiliteit fan spesifike enzyme types en de tanimming fan antwurd wearde fan metabolites fan de drug tolbutamide op 10 dagen en 7 dagen te ferifiearjen de systemen. Metabolite ferheegje antwurdwearde op 10 dagen en aktiviteit en metabolike stabiliteit fan spesifike enzymtypen op 7 dagen waarden bepaald om de systemen te falidearjen.
- (1) De twa systematyske prosessen foar medisynvalidaasjekultuer binne as folget:
IPHASE-HepatoMax™is in ko-kultuersysteem fan beferzen muorre primêre minsklike hepatocytes en stromale sellen. Primêre minsklike hepatocytes waarden reanimearre en ynkubearre mei stromale sellen yn HepatoP ™ medium foar 3 dagen om de drug administraasje assay te begjinnen, en it metabolisme fan it medisyn waard útfierd yn serum-frij HepatoDo ™ medium, dat waard oanfolle allinnich mei it medisyn sûnder it medium te feroarjen. In totaal fan 4, 72, 168 en 240 oeren nei medisyn administraasje waard de tafoege wearde fan drugsmetaboliten bepaald foar analyse.
IPHASE-HepatoCon™, oan 'e oare kant, is in systeem foar it kultivearjen fan beferzen oanhingjende primêre minsklike hepatocytes yn HepatoCon ™ medium. Nei it reanimearjen fan de primêre minskehepatocytes, de drug administraasje assay waard útfierd nei 3 dagen fan kultuer yn HepatoCon ™ medium allinnich, en de dêrop folgjende tiid fan administraasje, it kultuer systeem en de assay metodyk wiene itselde as dy fan de HepatoMax ™ systeem.
Underwilens, om de krektens en strangens fan 'e resultaten te garandearjen, hat IPHASE tagelyk in mediumkontrôle (sel-frij) en in stromale selkontrôle útfierd, mei trije replikaasjes, en de resultaten lieten sjen dat deIPHASE-HepatoMax™ enIPHASE-HepatoCon™ systemen produsearren in sterke peak metabolite reaksje fan dei 3 ôf, en dat se beide lieten in sterke metabolic omset rate.
- (2) Drugmetabolisme is benammen ôfhinklik fan 'e hepatocyteCYP450enzymsysteem, en syn aktiviteit kin wurde mjitten om better te ûndersiikjen.
DeIPHASE-HepatoMax™ enIPHASE-HepatoCon™ systemen hawwe goede tapasberens.
IPHASE set fjouwer kategoryen fan medium kontrôle (gjin sellen), HepatoMax ™, HepatoCon ™ en stromale sellen yn. Gebrûk fan muorre-oanhingjende primêre minskehepatocytes as foarbyld, de metabolite ferheging wearden fanCYP1A2, CYP2B6enCYP3A4waarden ferifiearre op dei 0, 3 en 7 nahepatocyteherstel foar 3 dagen mei respektivelik finasteride, bupropion en midazolam as de substraten. Metabolite ferheging wearden lieten sjen dat beideIPHASE-HepatoMax™ enIPHASE-HepatoCon™ systemen lieten aktive enzymaktiviteit sjen op dei 7, konsekwint it normale metabolisme fan medisinen befoarderje.
- (3) Neist de falidaasje fan enzymaktiviteit is goede metabolike stabiliteit ek in wichtige en ûnmisbere stap yn it falidearjen fan it nut fan in vitro modellen.
IPHASE sette trije kategoryen fan HepatoMax™, HepatoCon™ en stromale sellen yn om de metabolike stabiliteit fan Tolbutimide oer in perioade fan 80 oeren te bepalen mei oanhingjende primêre minsklike hepatocytes as foarbyld, dy't 3 dagen nei reanimaasje fan primêrehepatocytes, en de resultaten die bliken dat sawol deIPHASE-HepatoMax™ enIPHASE-HepatoCon™ systemen lieten beide robúste metabolike klaringsaktiviteit sjen binnen de langste wearde fan 'e assaytiid.
Gearfetsjend is IPHASE, as lieder yn in vitro bio-reagens, ûntwikkeleIPHASE HepatoMax™ enIPHASE HepatoCon™ in vitro modellen basearre op muorre - tapaste primêre minske, aap, hûn, rat en mûshepatocytes en stromale sellen fan ferskate genera, mei poerbêste metabolic omset, aktive enzyme aktiviteiten en krêftige metabolic klaring aktiviteiten, dy't biede nije karren foar ús klanten te ûntwikkeljen lege - klaring drugs, en binne in ûnmisbere partner te realisearje drug ûntdekking! DeIPHASE HepatoMax™ enIPHASE HepatoCon™ in vitro modellen biede poerbêste metabolic omset tariven, aktive enzyme aktiviteiten en sterke metabolic klaring aktiviteiten, it bieden fan nije opsjes foar klanten te ûntwikkeljen lege - klaring drugs, en binne in wichtige partner yn drug ûntdekking!
Referinsje:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, et al. In nije estafettemetoade foar it fêststellen fan lege-klaringswearden[J]. Drug metabolism and disposition, 2012, 40(9): 1860-1865.
Posttiid: 2024-07-19 17:20:41