Препаратты метаболиздендіретін ферменттердің белсенділігі in vitro инкубация уақытының ұзаруымен бірте-бірте төмендейтіндіктен, дәстүрлі in vitro метаболизм үлгілерінде қысқа инкубация уақыты, төмен метаболикалық конверсия және анықтаудың жоғары төменгі шегі сияқты шектеулер бар (CLint талдауының сандық төменгі шегі 2,5 мкл/(мин · 106 жасушаның метаболизмін дәл болжауға мүмкіндік бермейді))[1]. Осы арада,гепатоцитсалыстырғанда тотығу, тотықсыздану, гидролиз және димерлену реакциялары үшін қажетті ферменттер көбірек.бауыр микросомасы, және in vitro жүйелерінде көптеген жаңа үлгілер негізінде оңтайландырылғангепатоцит жүйеде ферменттердің белсенділігін сақтауды ұзарту үшін in vivo ортаны одан әрі имитациялайдыгепатоцитs, ал инкубация уақытының ұзаруы баяу метаболизденетін препараттардың жеткілікті метаболикалық трансформациясын бақылауға мүмкіндік береді.[1,2].
Осыны ескере отырып, IPHASE in vitro зерттеулерге арналған биологиялық реагенттерде көшбасшы ретінде адам, маймыл, ит, егеуқұйрық және тышқан және т.б. қоса алғанда, жабысқан бастапқы гепатоциттер мен стромальды жасушаларды зерттеуге негізделген HepatoMax™ жүйесін және HepatoCon™ медиа жүйесінде пионер болды.гепатоцитs мысал ретінде және екі жүйе де жүйелерді тексеру үшін арнайы фермент түрлерінің белсенділігі мен метаболикалық тұрақтылығын және 10 күн және 7 күн ішінде дәрілік толбутамид метаболиттерінің жауап мәнінің жоғарылауын анықтау үшін орнатылды. Жүйелерді валидациялау үшін 10 күндегі метаболиттің жоғарылау реакциясының мәні және 7 күнде белгілі бір фермент түрлерінің белсенділігі мен метаболикалық тұрақтылығы анықталды.
- (1) Дәрілік заттарды тексерудің екі жүйелі процесі келесідей:
IPHASE-HepatoMax™адамның мұздатылған қабырғалы бастапқы гепатоциттері мен стромалық жасушаларының ко-культуралық жүйесі болып табылады. Адамның бастапқы гепатоциттері реанимацияланды және препаратты енгізу талдауын бастау үшін HepatoP™ ортада стромальды жасушалармен 3 күн бойы инкубацияланды және препараттың метаболизмі сарысусыз HepatoDo™ ортасында жүргізілді, ол ортаны өзгертпей тек дәрімен толықтырылды. Дәрілік препаратты енгізгеннен кейін барлығы 4, 72, 168 және 240 сағаттан кейін талдау үшін дәрілік метаболиттердің қосылған құны анықталды.
IPHASE-HepatoCon™, екінші жағынан, HepatoCon™ ортасында мұздатылған жабысқан бастапқы адамның гепатоциттерін өсіруге арналған жүйе. Негізгі адамды реанимациядан кейінгепатоцитs, препаратты енгізу талдауы тек HepatoCon™ ортасында 3 күн культурадан кейін орындалды және кейінгі енгізу уақыты, культура жүйесі және талдау әдістемесі HepatoMax™ жүйесіндегімен бірдей болды.
Сонымен қатар, нәтижелердің дәлдігі мен қатаңдығын қамтамасыз ету үшін IPHASE бір мезгілде үш қайталаумен орта бақылауды (ұяшық-бос) және стромальды жасушаны бақылауды орындады және нәтижелер көрсеткендей,IPHASE-HepatoMax™ жәнеIPHASE-HepatoCon™ жүйелер 3-ші күннен бастап метаболитке күшті ең жоғары жауап берді және олардың екеуі де күшті метаболикалық айналым жылдамдығын көрсетті.
- (2) Дәрілік зат алмасу негізінен гепатоцитке байланыстыCYP450ферменттер жүйесін және оның белсенділігін жақсырақ зерттеу үшін өлшеуге болады.
TheIPHASE-HepatoMax™ жәнеIPHASE-HepatoCon™ жүйелердің қолдану мүмкіндігі жақсы.
IPHASE орта бақылаудың төрт санатын (ұяшықтарсыз), HepatoMax™, HepatoCon™ және стромальды жасушаларды орнатады. Қабырғаны қолдану-адгерентті негізгі адамгепатоцитМысал ретінде метаболиттің мәндерін жоғарылатуCYP1A2, CYP2B6жәнеCYP3A40, 3 және 7 күннен кейін тексерілдігепатоцитсубстрат ретінде сәйкесінше финастерид, бупропион және мидазоламды қолдану арқылы 3 күн бойы қалпына келтіру. Метаболиттердің жоғарылау мәндері екеуі де екенін көрсеттіIPHASE-HepatoMax™ жәнеIPHASE-HepatoCon™ Жүйелер 7-ші күні белсенді ферменттік белсенділікті көрсетті, бұл дәрілік заттардың қалыпты метаболизміне дәйекті түрде ықпал етті.
- (3)Фермент белсенділігін тексеруден басқа, жақсы метаболикалық тұрақтылық сонымен қатар in vitro үлгілерінің пайдалылығын тексерудегі маңызды және таптырмас қадам болып табылады.
IPHASE бірінші реттік реанимациядан кейін 3 күннен кейін енгізілген адамның бастапқы гепатоциттерін мысал ретінде пайдалана отырып, толбутимидтің 80 сағат ішінде метаболикалық тұрақтылығын анықтау үшін HepatoMax™, HepatoCon™ және стромальды жасушалардың үш санатын құрады.гепатоцитs, және нәтижелер екеуі де екенін көрсеттіIPHASE-HepatoMax™ жәнеIPHASE-HepatoCon™ жүйелердің екеуі де талдау уақытының ең ұзақ мәні ішінде сенімді метаболикалық клиренс белсенділігін көрсетті.
Қорытындылай келе, IPHASE in vitro био-реагенттерде көшбасшы ретінде дамыдыIPHASE HepatoMax™ жәнеIPHASE HepatoCon™ Қабырғалық-қолданбалы негізгі адам, маймыл, ит, егеуқұйрық және тышқанға негізделген in vitro үлгілерігепатоцитТамаша метаболикалық айналымы, белсенді ферменттік белсенділігі және күшті метаболикалық клиренсі бар әртүрлі тектегі s және стромальды жасушалар, олар біздің тұтынушыларымызға төмен клиренсті препараттарды жасау үшін жаңа таңдау ұсынады және дәрі-дәрмектің ашылуын жүзеге асырудың таптырмас серіктесі болып табылады! TheIPHASE HepatoMax™ жәнеIPHASE HepatoCon™ in vitro үлгілері метаболизмнің тамаша жылдамдығын, белсенді ферменттік белсенділікті және күшті метаболикалық клиренс белсенділіктерін ұсынады, тұтынушыларға төмен-клиренсті препараттарды әзірлеудің жаңа нұсқаларын ұсынады және дәрі-дәрмектерді табуда маңызды серіктес болып табылады!
Анықтама:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, т.б. Төмен-клиренс мәндерін[J] анықтауға арналған жаңа релелік әдіс. Дәрілік заттардың метаболизмі және диспозициясы, 2012, 40(9): 1860-1865.
Хабарлама уақыты: 2024-07-19 17:20:41