Zënter datt d'Drogenmetaboliséiere Enzymaktivitéite lues a lues erofgoen mat der Verlängerung vun der In-vitro-Inkubatiounszäit, hunn traditionell In-vitro-Metabolismus-Modeller Aschränkungen wéi kuerz Inkubatiounszäit, niddereg metabolesch Konversioun an héich ënnescht Detektiounsgrenz (déi quantitativ ënnescht Limit vum CLint-Assay ass 2,5 μL /(min·106 Zellen)), déi net präzis virausgesot kënne lues metaboliséiert Drogen.[1]. Mëttlerweil,hepatocytes hu méi Enzyme erfuerderlech fir Oxidatioun, Reduktioun, Hydrolyse an Dimeriséierungsreaktiounen am Verglach zuLiewer microsomes, an in vitro Systemer, vill Roman Modeller éischter optimiséiert baséiert op derhepatocyte System a weider d'In vivo Ëmfeld mimikéieren fir d'Retentioun vun der Enzymaktivitéit ze verlängerenhepatocytes, an d'Verlängerung vun der Inkubatiounszäit bitt d'Méiglechkeet genuch metabolesch Transformatioun vu luesen metaboliséierende Medikamenter ze iwwerwaachen[1, 2].
Am Hibléck vun dësem, IPHASE, als Leader am biologesche reagents fir In vitro Fuerschung, huet den HepatoMax ™ System an HepatoCon ™ Media System baséiert op der Etude vun adherent primär hepatocytes a stromal Zellen vun verschiddenen Gattungen, dorënner Mënsch, Af, Hënn, Rat, a Maus, entwéckelt, etc.hepatocytes als Beispill, a béid Systemer goufen opgestallt fir d'Bestëmmung vun der Aktivitéit an der metabolescher Stabilitéit vu spezifeschen Enzymtypen an d'Erhéijung vum Äntwertwäert vun de Metaboliten vum Medikament Tolbutamid op 10 Deeg a 7 Deeg fir d'Systemer z'iwwerpréiwen. Metabolit erhéijen d'Äntwertwäert op 10 Deeg an d'Aktivitéit an d'metabolesch Stabilitéit vu spezifeschen Enzymtypen op 7 Deeg goufen festgeluecht fir d'Systemer ze validéieren.
- (1) Déi zwee systematesch Drogenvalidatiounskulturprozesser sinn wéi follegt:
IPHASE-HepatoMax™ass e Ko-Kultursystem vu gefruerene walled primäre mënschlechen Hepatocyten a Stromalzellen. Primär mënschlech Hepatocyte goufen erëmbelieft a mat Stromalzellen am HepatoP ™ Medium fir 3 Deeg inkubéiert fir den Medikamentverwaltungsassay unzefänken, an de Stoffwechsel vum Medikament gouf a serum-fräi HepatoDo ™ Medium duerchgefouert, wat nëmme mam Medikament ersat gouf ouni de Medium z'änneren. Insgesamt 4, 72, 168 an 240 Stonnen no der Medikamentverwaltung gouf de Wäert vun der Medikamentmetabolite fir d'Analyse bestëmmt.
IPHASE-HepatoCon™, op der anerer Säit, ass e System fir gefruerene adherent primär mënschlech Hepatocyten am HepatoCon ™ Medium ze kultivéieren. No der Reanimatioun vum primäre Mënschhepatocytes, war d'Drogen Administratioun assay no 3 Deeg vun Kultur am HepatoCon ™ mëttelfristeg eleng gesuergt, an der pafolgende Zäit vun Administratioun, de Kultur System an d'assay Methodik waren déi selwecht wéi déi vun der HepatoMax ™ System.
Mëttlerweil, fir d'Genauegkeet an d'Rigoritéit vun de Resultater ze garantéieren, huet d'IPHASE eng mëttel Kontroll (Zell-fräi) an eng Stromalzellkontroll zur selwechter Zäit gemaach, mat dräi Replikatiounen, an d'Resultater weisen datt deIPHASE-HepatoMax™ anIPHASE-HepatoCon™ Systemer produzéiert eng staark Peak Metabolit Äntwert vum Dag 3 un, an datt si souwuel eng staark metabolic Ëmsaz Taux gewisen.
- (2) Drogenmetabolismus ass haaptsächlech ofhängeg vun der HepatocytCYP450Enzymsystem, a seng Aktivitéit ka gemooss ginn fir besser z'ënnersichen.
DéiIPHASE-HepatoMax™ anIPHASE-HepatoCon™ Systemer hunn eng gutt Applikatioun.
IPHASE ageriicht véier Kategorien vu mëttlerer Kontroll (keng Zellen), HepatoMax ™, HepatoCon ™ a Stromalzellen. Benotzt Mauer-adherent primär Mënschhepatocytes als Beispill, de Metabolit Erhéijung Wäerter vunCYP1A2, CYP2B6anCYP3A4goufen um Dag verifizéiert 0, 3 an 7 nohepatocyteErhuelung fir 3 Deeg mat Finasterid, Bupropion a Midazolam als Substrate respektiv. Metabolit Erhéijung Wäerter gewisen, datt souwuelIPHASE-HepatoMax™ anIPHASE-HepatoCon™ Systemer hunn aktiv Enzymaktivitéit vum Dag 7 gewisen, konsequent normalen Drogenmetabolismus förderen.
- (3) Zousätzlech zu der Validatioun vun der Enzymaktivitéit ass gutt metabolesch Stabilitéit och e wichtegen an onverzichtbare Schrëtt fir d'Nëtzlechkeet vun in vitro Modeller ze validéieren.
IPHASE huet dräi Kategorien vun HepatoMax ™, HepatoCon ™ a Stromalzellen opgestallt fir d'metabolesch Stabilitéit vun Tolbutimide iwwer eng Period vun 80 Stonnen ze bestëmmen andeems se adherent primär mënschlech Hepatocyten als Beispill benotzt, déi 3 Deeg no der Reanimatioun vun der Primärschoul verwalt goufen.hepatocytes, an d'Resultater gewisen, datt souwuel deIPHASE-HepatoMax™ anIPHASE-HepatoCon™ Systemer souwuel robust metabolic Clearance Aktivitéit am längsten Wäert vun der Assay Zäit gewisen.
Zesummegefaasst huet IPHASE, als Leader an in vitro Bio-Reagenser, entwéckeltIPHASE HepatoMax™ anIPHASE HepatoCon™ in vitro Modeller baséiert op Mauer-applizéiert primär Mënsch, Af, Hënn, Rat a Maushepatocytes a stromal Zellen vu verschiddene Gattungen, mat excellent metabolic Ëmsaz, aktiv Enzym Aktivitéiten a mächteg metabolic Clearance Aktivitéiten, déi nei Choixe fir eise Clienten Offer niddereg-clearance Drogen ze entwéckelen, a sinn en onverzichtbare Partner Drogen Entdeckung ze realiséieren! DéiIPHASE HepatoMax™ anIPHASE HepatoCon™ in vitro Modeller bidden exzellent metabolesch Ëmsazraten, aktiv Enzymaktivitéiten a staark metabolesch Clearance Aktivitéiten, déi nei Méiglechkeete fir Clienten ubidden fir Low-Clarance Medikamenter z'entwéckelen, a sinn e wichtege Partner an der Drogenentdeckung!
Referenz:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, et al. Eng nei Relaismethod fir d'Bestëmmung vun niddrege-Klärungswäerter[J]. Drogenmetabolismus an Dispositioun, 2012, 40(9): 1860-1865.
Post Zäit: 2024-07-19 17:20:41