Þar sem virkni ensíma sem umbrotnar lyf minnkar smám saman með lengingu in vitro ræktunartíma, hafa hefðbundin in vitro efnaskiptalíkön takmarkanir eins og stuttan ræktunartíma, lítil efnaskiptabreyting og há neðri greiningarmörk (megindleg neðri mörk CLint prófunar eru 2,5 μL /(mín·106 frumur)), sem geta ekki sagt nákvæmlega fyrir um hæg umbrot lyfs.[1]. Á meðan,lifrarfrumus hafa fleiri ensím sem þarf til oxunar, minnkunar, vatnsrofs og dimerization viðbrögð samanborið viðlifrarmíkrósóm, og in vitro kerfi, hafa mörg ný líkön tilhneigingu til að vera fínstillt út frálifrarfrumu kerfi og líkja frekar eftir umhverfinu in vivo til að lengja varðveislu ensímvirkni ílifrarfrumus, og lenging ræktunartímans gefur möguleika á að fylgjast með nægjanlegri efnaskiptabreytingu lyfja sem umbrotnar hægt.[1,2].
Í ljósi þessa hefur IPHASE, sem leiðandi í líffræðilegum hvarfefnum fyrir in vitro rannsóknir, verið brautryðjandi HepatoMax™ System og HepatoCon™ Media System byggt á rannsóknum á viðloðandi frumlifrarfrumum og straumfrumum af ýmsum ættkvíslum, þar á meðal mönnum, öpum, hundum, rottum og músum, o.s.frv.lifrarfrumus sem dæmi, og bæði kerfin voru sett upp til að ákvarða virkni og efnaskiptastöðugleika tiltekinna ensímtegunda og hækkun á svörunargildi umbrotsefna lyfsins tólbútamíðs eftir 10 daga og 7 daga til að sannreyna kerfin. Umbrotsefni auka svörunargildi eftir 10 daga og virkni og efnaskiptastöðugleiki sérstakra ensímtegunda eftir 7 daga voru ákvarðaðar til að sannreyna kerfin.
- (1) Þessi tvö kerfisbundnu lyfjafullgildingarræktunarferli eru sem hér segir:
IPHASE-HepatoMax™er samræktunarkerfi af frosnum veggjum aðallifrarfrumum og stromal frumum úr mönnum. Aðallifrarfrumur manna voru endurlífgaðar og ræktaðar með stromal frumum í HepatoP™ miðli í 3 daga til að hefja lyfjagjafaprófið og umbrot lyfsins fóru fram í sermi-fríum HepatoDo™ miðli, sem var aðeins fyllt á með lyfinu án þess að skipta um miðil. Alls 4, 72, 168 og 240 klukkustundum eftir lyfjagjöf var virðisauki umbrotsefna lyfja ákvarðaður til greiningar.
IPHASE-HepatoCon™, aftur á móti, er kerfi til að rækta frosnar viðloðnar aðallifrarfrumur úr mönnum í HepatoCon™ miðli. Eftir endurlífgun aðalmannsinslifrarfrumus, var lyfjagjafarprófið framkvæmt eftir 3 daga ræktun í HepatoCon™ miðli einum sér og síðari gjöfin var ræktunarkerfið og greiningaraðferðin sú sama og í HepatoMax™ kerfinu.
Á sama tíma, til að tryggja nákvæmni og nákvæmni niðurstaðna, framkvæmdi IPHASE miðlungsstýringu (frumu-frjáls) og stromalfrumustýringu á sama tíma, með þremur endurteknum, og niðurstöðurnar sýndu aðIPHASE-HepatoMax™ ogIPHASE-HepatoCon™ kerfin framleiddu sterka hámarkssvörun umbrotsefna frá 3. degi og áfram, og að þau sýndu bæði mikla efnaskiptahraða.
- (2) Umbrot lyfja er aðallega háð lifrarfrumunniCYP450ensímkerfi, og hægt er að mæla virkni þess til að skoða betur.
TheIPHASE-HepatoMax™ ogIPHASE-HepatoCon™ kerfi hafa góða nothæfi.
IPHASE setti upp fjóra flokka miðlungsstýringar (engar frumur), HepatoMax™, HepatoCon™ og stromal frumur. Notar vegg-aðalhæft aðalmanneskjalifrarfrumus sem dæmi, umbrotsefni auka gildi afCYP1A2, CYP2B6ogCYP3A4voru staðfest á degi 0, 3 og 7 eftirlifrarfrumubata í 3 daga með því að nota finasteríð, búprópíón og mídazólam sem hvarfefni, í sömu röð. Umbrotshækkunargildi sýndu að bæðiIPHASE-HepatoMax™ ogIPHASE-HepatoCon™ kerfi sýndu virka ensímvirkni á 7. degi, sem stuðlaði stöðugt að eðlilegum umbrotum lyfja.
- (3) Til viðbótar við staðfestingu á ensímvirkni er góður efnaskiptastöðugleiki einnig mikilvægt og ómissandi skref í að sannreyna notagildi in vitro líkana.
IPHASE setti upp þrjá flokka af HepatoMax™, HepatoCon™ og stromal frumum til að ákvarða efnaskiptastöðugleika Tolbutimides á 80 klukkustunda tímabili með því að nota viðloðandi aðallifrarfrumur úr mönnum sem dæmi, sem voru gefnar 3 dögum eftir endurlífgunlifrarfrumus, og niðurstöðurnar sýndu að bæðiIPHASE-HepatoMax™ ogIPHASE-HepatoCon™ kerfin sýndu bæði öfluga efnaskiptaúthreinsunarvirkni innan lengsta gildis mælingartímans.
Í stuttu máli, IPHASE, sem leiðandi í in vitro líffræðilegum-hvarfefnum, hefur þróastIPHASE HepatoMax™ ogIPHASE HepatoCon™ in vitro líkön byggð á vegg-beitt aðalmenni, öpum, hundum, rottum og músumlifrarfrumus og stromal frumur af ýmsum ættkvíslum, með framúrskarandi efnaskiptaveltu, virka ensímvirkni og öfluga efnaskiptaúthreinsunarstarfsemi, sem bjóða viðskiptavinum okkar nýja möguleika til að þróa lág-úthreinsunarlyf og eru ómissandi samstarfsaðili til að átta sig á lyfjauppgötvun! TheIPHASE HepatoMax™ ogIPHASE HepatoCon™ in vitro líkön bjóða upp á framúrskarandi efnaskiptaveltu, virka ensímvirkni og sterka efnaskiptaúthreinsunarvirkni, veita viðskiptavinum nýja möguleika til að þróa lág-úthreinsunarlyf og eru mikilvægur samstarfsaðili í lyfjauppgötvun!
Tilvísun:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, o.fl. Ný gengisaðferð til að ákvarða lág-úthreinsunargildi[J]. Umbrot og ráðstöfun lyfja, 2012, 40(9): 1860-1865.
Pósttími: 2024-07-19 17:20:41