Дарыны метаболизациялоочу ферменттин активдүүлүгү in vitro инкубациялоо убактысынын узартылышы менен акырындык менен азайгандыктан, in vitro метаболизминин салттуу моделдеринде кыска инкубация убактысы, метаболизмдин төмөнкү конверсиясы жана аныктоонун жогорку чеги сыяктуу чектөөлөр бар (CLint анализинин сандык төмөнкү чеги 2,5 мкЛ/(мин · 106 клетканын метаболизмин так айта албайт))[1]. Ошол эле учурда,гепатоциткараганда кычкылдануу, калыбына келтирүү, гидролиз жана димерлөө реакциялары үчүн зарыл болгон ферменттерге көбүрөөк ээ.боор микросомасы, жана in vitro системалары, көптөгөн жаңы моделдер оптималдаштырылгангепатоцит системаны жана андан ары in vivo чөйрөнү туурап, ферменттердин активдүүлүгүн сактоону узартатгепатоцитс, ал эми инкубациялоо убактысынын узартылышы жай метаболизмдүү дарылардын жетиштүү метаболикалык трансформациясын көзөмөлдөө мүмкүнчүлүгүн берет.[1,2].
Ушуну эске алуу менен, IPHASE, in vitro изилдөөлөр үчүн биологиялык реагенттерде лидер катары, адам, маймыл, ит, келемиш жана чычкан ж.б., анын ичинде адам, маймыл, ит, келемиш жана чычкан ж.б. жабышкан баштапкы гепатоциттерди жана стромдук клеткаларды изилдөөнүн негизинде HepatoMax™ системасын жана HepatoCon™ Media системасын пионер болуп иштеп чыкты.гепатоцитМисалы, эки система тең ферменттердин белгилүү түрлөрүнүн активдүүлүгүн жана метаболизминин туруктуулугун аныктоо жана системаларды текшерүү үчүн толбутамид дарынын метаболиттеринин жооптук маанисин 10 күн жана 7 күндө жогорулатуу үчүн түзүлгөн. Системаларды текшерүү үчүн 10 күндө метаболиттин жогорулашынын жооп мааниси жана 7 күндө белгилүү бир фермент түрлөрүнүн активдүүлүгү жана метаболизминин туруктуулугу аныкталган.
- (1) эки системалуу дары валидация маданият жараяндары болуп төмөнкүлөр саналат:
IPHASE-HepatoMax™адамдын тоңдурулган дубалдуу негизги гепатоциттеринин жана стромалык клеткаларынын ко-культура системасы. Негизги адамдын гепатоциттери реанимацияланган жана 3 күн бою HepatoP™ чөйрөсүндө стромалык клеткалар менен инкубацияланган, ал эми препараттын метаболизми сывороткасыз HepatoDo™ чөйрөсүндө жүргүзүлүп, чөйрөнү өзгөртпөстөн дары менен гана толукталган. Дары колдонуудан 4, 72, 168 жана 240 саат өткөндөн кийин анализ үчүн дары метаболиттеринин кошумча нарктары аныкталган.
IPHASE-HepatoCon™, экинчи жагынан, HepatoCon™ чөйрөсүндө тоңдурулган жабышкан негизги адамдын гепатоциттерин өстүрүү системасы. Негизги адамдын реанимациясынан кийингепатоцитs, дарыны башкаруу анализи жалгыз HepatoCon™ чөйрөсүндө 3 күндүк культурадан кийин аткарылган жана кийинки киргизүү убактысы, культура системасы жана анализдин методологиясы HepatoMax™ тутумундагыдай эле.
Ошол эле учурда, жыйынтыктардын тактыгын жана катаалдыгын камсыз кылуу үчүн, IPHASE бир эле учурда орто башкарууну (клетка-эркин) жана стромалык клетканы башкарууну үч кайталоо менен аткарды жана натыйжалар көрсөткөндөй,IPHASE-HepatoMax™ жанаIPHASE-HepatoCon™ системалар 3 күндөн тартып күчтүү чокусу метаболиттик жооп өндүрүлгөн, жана алар экөө тең күчтүү метаболизм жүгүртүү ылдамдыгын көрсөткөн.
- (2) Дары зат алмашуу негизинен гепатоцитке көз карандыCYP450энзим системасын жана анын активдүүлүгүн жакшыраак изилдөө үчүн өлчөөгө болот.
TheIPHASE-HepatoMax™ жанаIPHASE-HepatoCon™ системалары жакшы колдонуу мүмкүнчүлүгү бар.
IPHASE орто башкаруунун төрт категориясын түздү (клеткалар жок), HepatoMax™, HepatoCon™ жана стромалык клеткалар. Дубалды колдонуу - жабышкан негизги адамгепатоцитМисалы, метаболиттин баалуулуктарын жогорулатууCYP1A2, CYP2B6жанаCYP3A40, 3 жана 7 күндөн кийин текшерилдигепатоцитсубстрат катары финастерид, бупропион жана мидазоламды колдонуу менен 3 күн бою калыбына келтирүү. Метаболиттерди жогорулатуу баалуулуктары экөө тең экенин көрсөттүIPHASE-HepatoMax™ жанаIPHASE-HepatoCon™ системалар 7-күнгө карата активдүү фермент активдүүлүгүн көрсөтүп, ырааттуу түрдө дары-дармектин нормалдуу метаболизмине көмөктөшөт.
- (3) Ферменттердин активдүүлүгүн текшерүүдөн тышкары, жакшы метаболикалык туруктуулук да in vitro моделдердин пайдалуулугун текшерүүдө маанилүү жана зарыл кадам болуп саналат.
IPHASE Толбутимиддин 80 сааттын ичинде метаболизмдик туруктуулугун аныктоо үчүн HepatoMax™, HepatoCon™ жана стромалык клеткалардын үч категориясын түздү, мисалы, адамдын жабышкан негизги гепатоциттерин колдонуу менен, алар баштапкы реанимациядан 3 күндөн кийин киргизилген.гепатоцитс, жана натыйжалар да көрсөттүIPHASE-HepatoMax™ жанаIPHASE-HepatoCon™ системалардын экөө тең анализ убактысынын эң узун маанисинде күчтүү метаболикалык тазалоо активдүүлүгүн көрсөттү.
Жыйынтыктап айтканда, IPHASE, in vitro био-реагенттерде лидер катары иштелип чыкканIPHASE HepatoMax™ жанаIPHASE HepatoCon™ дубал-колдонмо негизги адам, маймыл, ит, келемиш жана чычкан негизделген in vitro моделдергепатоцитs жана ар кандай тукумдагы стромалык клеткалар, мыкты метаболизмдик жүгүртүүсү, активдүү фермент активдүүлүгү жана күчтүү метаболизмдик клиренси менен, биздин кардарларыбызга клиренси төмөн дарыларды иштеп чыгуу үчүн жаңы тандоолорду сунуштайт жана дары-дармекти ачууда ажырагыс өнөктөш! TheIPHASE HepatoMax™ жанаIPHASE HepatoCon™ in vitro моделдери эң сонун метаболикалык айлануу ылдамдыгын, активдүү ферменттик активдүүлүктөрдү жана күчтүү метаболизмдик клиренс иш-аракеттерин сунуштайт, кардарларга клиренси төмөн дарыларды иштеп чыгуунун жаңы варианттарын сунуштайт жана дары-дармектерди ачууда маанилүү өнөктөш болуп саналат!
Шилтеме:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, ж.б. Төмөн-клиренстик маанилерди [J] аныктоо үчүн жаңы реле ыкмасы. Drug метаболизм жана жайгаштыруу, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Билдирүү убактысы: 2024-07-19 17:20:41