In vitro 배양 시간이 길어짐에 따라 약물 대사 효소 활성이 점차 감소하기 때문에 전통적인 in vitro 대사 모델은 짧은 배양 시간, 낮은 대사 전환, 높은 검출 하한(CLint 분석의 정량적 하한은 2.5 μL/(min·106 세포)) 등의 한계가 있어 천천히 대사되는 약물의 CLint를 정확하게 예측할 수 없습니다.[1]. 한편,간세포에 비해 산화, 환원, 가수분해 및 이량체화 반응에 필요한 효소가 더 많습니다.간 마이크로솜, 그리고 시험관 내 시스템에서는 많은 새로운 모델이 다음을 기반으로 최적화되는 경향이 있습니다.간세포 시스템은 생체 내 환경을 더욱 모방하여 효소 활성의 유지를 연장합니다.간세포s, 배양 시간의 연장은 느린 대사 약물의 충분한 대사 변형을 모니터링할 수 있는 가능성을 제공합니다.[1,2].
이에 IPHASE는 체외 연구용 생물학적 시약 분야의 선두주자로서 인간, 원숭이, 개, 쥐, 마우스 등 다양한 속의 부착성 일차 간세포 및 기질 세포 연구를 기반으로 HepatoMax™ 시스템 및 HepatoCon™ 미디어 시스템을 개발했습니다. HepatoMax™ 시스템 및 HepatoCon™ 미디어 시스템은 부착성 일차 인간을 사용하여 개발되었습니다.간세포s 예를 들어, 특정 효소 유형의 활성 및 대사 안정성을 확인하고 10일 및 7일에 약물 톨부타미드의 대사산물 반응 값의 증가를 확인하기 위해 두 시스템을 모두 설정하여 시스템을 검증했습니다. 10일째의 대사물 증가 반응 값과 7일째의 특정 효소 유형의 활성 및 대사 안정성을 측정하여 시스템을 검증했습니다.
- (1) 두 가지 체계적인 약물 밸리데이션 배양 과정은 다음과 같습니다.
IPHASE-헤파토맥스™냉동 벽으로 둘러싸인 일차 인간 간세포와 간질 세포의 공동 배양 시스템입니다. 일차 인간 간세포를 소생시켜 HepatoP™ 배지에서 간질세포와 함께 3일 동안 배양하여 약물 투여 분석을 시작하였고, 약물의 대사는 배지를 바꾸지 않고 약물만 보충한 무혈청 HepatoDo™ 배지에서 진행하였다. 약물 투여 후 총 4시간, 72시간, 168시간 및 240시간에 약물 대사산물의 부가 가치를 측정하여 분석하였다.
IPHASE-헤파토콘™, 는 HepatoCon™ 배지에서 냉동 부착성 일차 인간 간세포를 배양하는 시스템입니다. 일차 인간을 소생시킨 후간세포s, 약물투여 분석은 헤파토콘(HepatoCon™) 배지 단독 배양 후 3일간 실시하였으며, 이후의 투여 시점, 배양 시스템 및 분석 방법은 헤파토맥스(HepatoMax™) 시스템과 동일하였다.
한편, 결과의 정확성과 엄격성을 보장하기 위해 IPHASE는 배지 대조(cell-free)와 기질 세포 대조를 동시에 3회 반복 수행한 결과,IPHASE-헤파토맥스™ 그리고IPHASE-헤파토콘™ 시스템은 3일차부터 강력한 최대 대사산물 반응을 나타냈으며 둘 다 강한 대사 회전율을 보여주었습니다.
- (2) 약물대사는 주로 간세포에 의존한다.CYP450효소 시스템과 그 활성을 측정하여 더 잘 조사할 수 있습니다.
는IPHASE-헤파토맥스™ 그리고IPHASE-헤파토콘™ 체계에는 좋은 적용성이 있습니다.
IPHASE는 배지 대조(세포 없음), HepatoMax™, HepatoCon™ 및 간질 세포의 네 가지 범주를 설정했습니다. 벽-접착형 1차 인간 사용간세포예를 들어, 대사산물의 값이 증가합니다.CYP1A2, CYP2B6그리고CYP3A4이후 0, 3, 7일차에 확인되었습니다.간세포각각 피나스테리드, 부프로피온, 미다졸람을 기질로 사용하여 3일 동안 회복시켰습니다. 대사물 증가 값은 두 가지 모두를 보여주었습니다.IPHASE-헤파토맥스™ 그리고IPHASE-헤파토콘™ 시스템은 7일까지 활성 효소 활성을 보여 정상적인 약물 대사를 지속적으로 촉진했습니다.
- (3) 효소 활성 검증 외에도 우수한 대사 안정성은 시험관 내 모델의 유용성을 검증하는 데 중요하고 필수적인 단계입니다.
IPHASE는 HepatoMax™, HepatoCon™ 및 간질 세포의 세 가지 범주를 설정하여 부착성 일차 인간 간세포를 예로 들어 일차 간세포 소생 3일 후에 투여한 80시간 동안 Tolbutimide의 대사 안정성을 확인했습니다.간세포s, 그리고 그 결과는 두 가지 모두IPHASE-헤파토맥스™ 그리고IPHASE-헤파토콘™ 두 시스템 모두 분석 시간의 가장 긴 값 내에서 강력한 대사 제거 활성을 보여주었습니다.
요약하자면, IPHASE는 체외 바이오시약 분야의 선두주자로서IPHASE HepatoMax™ 그리고IPHASE HepatoCon™ 벽에 적용된 일차 인간, 원숭이, 개, 쥐 및 마우스를 기반으로 한 시험관 내 모델간세포우수한 대사 회전율, 활성 효소 활성 및 강력한 대사 제거 활성을 갖춘 다양한 속 및 간질 세포는 고객에게 저배출 약물 개발을 위한 새로운 선택을 제공하고 신약 개발을 실현하는 데 없어서는 안 될 파트너입니다! 는IPHASE HepatoMax™ 그리고IPHASE HepatoCon™ 시험관 내 모델은 뛰어난 대사 회전율, 활성 효소 활동 및 강력한 대사 제거 활동을 제공하여 고객에게 저제거율 약물을 개발할 수 있는 새로운 옵션을 제공하며 약물 발견의 중요한 파트너입니다!
참조:
[1] 阮婷婷, 鞠武建,熊海伟,等.低清除率药물체대谢稳定性预测模型研究进进进进进进进进进进进[J].中國药科大science报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, 등. 저간격 값[J]을 결정하는 새로운 릴레이 방법. 약물 대사 및 배치, 2012, 40(9): 1860-1865.
게시 시간: 2024-07-19 17:20:41