Ker se aktivnosti encimov, ki presnavljajo zdravila, postopoma zmanjšujejo s podaljševanjem inkubacijskega časa in vitro, imajo tradicionalni modeli presnove in vitro omejitve, kot so kratek inkubacijski čas, nizka presnovna pretvorba in visoka spodnja meja zaznavnosti (kvantitativna spodnja meja testa CLint je 2,5 μL /(min · 106 celic)), ki ne morejo natančno predvideti CLint počasi presnovljenih zdravil.[1]. medtem,hepatocitimajo več encimov, potrebnih za reakcije oksidacije, redukcije, hidrolize in dimerizacije v primerjavi zjetrni mikrosomiin v sistemih in vitro je veliko novih modelov ponavadi optimiziranih na podlagihepatocit sistem in nadalje posnemajo okolje in vivo, da podaljšajo zadrževanje encimske aktivnosti vhepatocits, podaljšanje inkubacijskega časa pa omogoča spremljanje zadostne presnovne transformacije počasi presnavljajočih se zdravil.[1,2].
Glede na to je IPHASE kot vodilni na področju bioloških reagentov za in vitro raziskave pionir sistema HepatoMax™ in HepatoCon™ Media System, ki temelji na študiji adherentnih primarnih hepatocitov in stromalnih celic različnih rodov, vključno s človeškimi, opičjimi, pasjimi, podganimi in mišjimi itd. HepatoMax™ System in HepatoCon™ Media System sta bila razvita z uporabo adherentnih primarnih človeškihhepatocits kot primer, in oba sistema sta bila nastavljena za določanje aktivnosti in presnovne stabilnosti specifičnih vrst encimov ter povečanje vrednosti odziva metabolitov zdravila tolbutamid po 10 dneh in 7 dneh za preverjanje sistemov. Za potrditev sistemov je bila določena vrednost odziva povečanja metabolita po 10 dneh ter aktivnost in presnovna stabilnost specifičnih tipov encimov po 7 dneh.
- (1) Dva sistematična postopka kulture potrjevanja zdravil sta naslednja:
IPHASE-HepatoMax™je sistem sokulture primarnih človeških hepatocitov in stromalnih celic z zamrznjeno steno. Primarne človeške hepatocite smo oživili in inkubirali s stromalnimi celicami v mediju HepatoP™ 3 dni, da smo začeli preskus dajanja zdravila, presnovo zdravila pa smo izvedli v mediju HepatoDo™ brez seruma, ki smo ga dopolnili samo z zdravilom brez menjave medija. Skupaj 4, 72, 168 in 240 ur po dajanju zdravila je bila za analizo določena dodana vrednost presnovkov zdravil.
IPHASE-HepatoCon™, na drugi strani pa je sistem za gojenje zamrznjenih adherentnih primarnih človeških hepatocitov v mediju HepatoCon™. Po oživljanju primarnega človekahepatocits, je bil test dajanja zdravila izveden po 3 dneh gojenja v samem mediju HepatoCon™, nadaljnji čas dajanja, sistem kulture in metodologija testiranja pa so bili enaki kot pri sistemu HepatoMax™.
Medtem je IPHASE za zagotovitev točnosti in strogosti rezultatov izvedel srednjo kontrolo (brez celic) in kontrolo stromalnih celic hkrati, s tremi ponovitvami, in rezultati so pokazali, daIPHASE-HepatoMax™ inIPHASE-HepatoCon™ sistemi so povzročili močan najvišji presnovni odziv od 3. dneva naprej in da sta oba pokazala močno stopnjo presnovne presnove.
- (2) Presnova zdravil je v glavnem odvisna od hepatocitaCYP450encimskega sistema, njegovo aktivnost pa je mogoče izmeriti za boljši pregled.
TheIPHASE-HepatoMax™ inIPHASE-HepatoCon™ sistemi imajo dobro uporabnost.
IPHASE je nastavil štiri kategorije medijskega nadzora (brez celic), HepatoMax™, HepatoCon™ in stromalne celice. Uporaba primarnega človeka, ki se drži stenehepatocits kot primer, metabolit poveča vrednostiCYP1A2, CYP2B6inCYP3A4so bili preverjeni na dan 0, 3 in 7 po temhepatocitokrevanje 3 dni z uporabo finasterida, bupropiona in midazolama kot substratov. Povečane vrednosti metabolitov so pokazale, da obojeIPHASE-HepatoMax™ inIPHASE-HepatoCon™ sistemi so pokazali aktivno encimsko aktivnost do 7. dne, kar dosledno spodbuja normalno presnovo zdravil.
- (3) Poleg validacije encimske aktivnosti je dobra presnovna stabilnost tudi pomemben in nepogrešljiv korak pri validaciji uporabnosti in vitro modelov.
IPHASE je nastavil tri kategorije HepatoMax™, HepatoCon™ in stromalnih celic za določitev presnovne stabilnosti tolbutimida v obdobju 80 ur z uporabo adherentnih primarnih človeških hepatocitov kot primera, ki so bili aplicirani 3 dni po oživljanju primarnegahepatocits, rezultati pa so pokazali, da takoIPHASE-HepatoMax™ inIPHASE-HepatoCon™ Oba sistema sta pokazala močno aktivnost presnovnega očistka v najdaljši vrednosti časa testa.
Če povzamemo, se je razvil IPHASE kot vodilni v in vitro bioreagentihIPHASE HepatoMax™ inIPHASE HepatoCon™ in vitro modeli, ki temeljijo na stenskih - primarnih ljudeh, opicah, psih, podganah in mišihhepatocits in stromalnih celic različnih rodov, z odlično presnovo, aktivnimi encimskimi aktivnostmi in močnimi presnovnimi aktivnostmi očistka, ki našim strankam ponujajo nove izbire za razvoj zdravil z nizkim - očistkom in so nepogrešljiv partner pri uresničevanju odkrivanja zdravil! TheIPHASE HepatoMax™ inIPHASE HepatoCon™ in vitro modeli ponujajo odlične stopnje metabolizma, aktivne encimske aktivnosti in močne presnovne očistne aktivnosti, strankam zagotavljajo nove možnosti za razvoj zdravil z nizkim očistkom in so pomemben partner pri odkrivanju zdravil!
Referenca:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, et al. Nova relejna metoda za določanje nizkih vrednosti zračnosti [J]. Presnova in dispozicija zdravil, 2012, 40(9): 1860-1865.
Čas objave: 2024-07-19 17:20:41