कादंबरी इन विट्रो हेपॅटोसाइट चयापचय मॉडेल धीमे-चयापचय फार्माकोकाइनेटिक अभ्यास सुलभ करते

इन विट्रो उष्मायन वेळेच्या वाढीसह औषध चयापचय एंझाइम क्रियाकलाप हळूहळू कमी होत असल्याने, पारंपारिक इन विट्रो चयापचय मॉडेल्सला मर्यादा आहेत जसे की कमी उष्मायन वेळ, कमी चयापचय रूपांतरण आणि शोधण्याची उच्च खालची मर्यादा (क्लिंट परखाची परिमाणात्मक खालची मर्यादा 2.5 μL · 16 CL / () 2.5 μL आहे, जे पेशी कमी करू शकत नाहीत. हळूहळू चयापचय झालेल्या औषधांचा^[1]. दरम्यान,हिपॅटोसाइटs मध्ये ऑक्सिडेशन, रिडक्शन, हायड्रोलिसिस आणि डायमेरायझेशन प्रतिक्रियांसाठी अधिक एंजाइम आवश्यक असतातयकृत मायक्रोसोम, आणि इन विट्रो सिस्टममध्ये, अनेक नवीन मॉडेल्सच्या आधारे ऑप्टिमाइझ केले जातातहिपॅटोसाइट मध्ये एंजाइमची क्रिया दीर्घकाळ टिकवून ठेवण्यासाठी प्रणाली आणि पुढे vivo वातावरणाची नक्कल करतेहिपॅटोसाइटs, आणि उष्मायन वेळ वाढवण्यामुळे मंद चयापचय करणाऱ्या औषधांच्या पुरेशा चयापचय परिवर्तनाचे निरीक्षण करण्याची शक्यता प्रदान करते.^[1,2].

हे लक्षात घेऊन, इन विट्रो संशोधनासाठी जैविक अभिकर्मकांमध्ये एक नेता म्हणून, IPHASE ने HepatoMax™ सिस्टीम आणि HepatoCon™ मीडिया सिस्टीमची पायनियरिंग केली आहे, ज्यामध्ये मानव, माकड, कुत्रा, उंदीर आणि उंदीर इत्यादींचा समावेश असलेल्या अनुयायी प्राथमिक हेपॅटोसाइट्स आणि स्ट्रोमल पेशींच्या अभ्यासावर आधारित आहे. मानवहिपॅटोसाइटs एक उदाहरण म्हणून, आणि दोन्ही प्रणाली विशिष्ट एंजाइम प्रकारांच्या क्रियाकलाप आणि चयापचय स्थिरता निश्चित करण्यासाठी आणि सिस्टमची पडताळणी करण्यासाठी 10 दिवस आणि 7 दिवसांनी टॉल्ब्युटामाइड औषधाच्या चयापचयांच्या प्रतिसाद मूल्यात वाढ करण्यासाठी सेट केली गेली. मेटाबोलाइट 10 दिवसांनी प्रतिसाद मूल्य वाढवते आणि 7 दिवसात विशिष्ट एंजाइम प्रकारांची क्रियाकलाप आणि चयापचय स्थिरता सिस्टम प्रमाणित करण्यासाठी निर्धारित केली गेली.

• (1) दोन पद्धतशीर औषध प्रमाणीकरण संस्कृती प्रक्रिया खालीलप्रमाणे आहेत:

  IPHASE-HepatoMax™गोठलेल्या भिंतींच्या प्राथमिक मानवी हिपॅटोसाइट्स आणि स्ट्रोमल पेशींची सह-संस्कृती प्रणाली आहे. प्राथमिक मानवी हिपॅटोसाइट्सचे पुनरुत्थान केले गेले आणि औषध प्रशासन परख सुरू करण्यासाठी 3 दिवसांसाठी HepatoP™ माध्यमातील स्ट्रोमल पेशींनी उष्मायन केले गेले आणि औषधाचे चयापचय सीरम-फ्री हेपॅटोडो™ माध्यमात केले गेले, जे माध्यम न बदलता फक्त औषधाने भरले गेले. औषध प्रशासनानंतर एकूण 4, 72, 168 आणि 240 तासांनंतर, विश्लेषणासाठी औषध चयापचयांचे मूल्य जोडले गेले.

 

  IPHASE-HepatoCon™, दुसरीकडे, HepatoCon™ माध्यमात गोठलेल्या अनुयायी प्राथमिक मानवी हिपॅटोसाइट्सचे संवर्धन करणारी एक प्रणाली आहे. प्राथमिक मानवाचे पुनरुत्थान केल्यानंतरहिपॅटोसाइटs, औषध प्रशासनाची परख केवळ HepatoCon™ माध्यमात संस्कृतीच्या 3 दिवसांनंतर केली गेली आणि त्यानंतरच्या प्रशासनाची वेळ, कल्चर सिस्टम आणि परख पद्धती HepatoMax™ प्रणाली प्रमाणेच होती.

 

दरम्यान, परिणामांची अचूकता आणि कठोरता सुनिश्चित करण्यासाठी, आयपीएचएएसईने एकाच वेळी तीन प्रतिकृतींसह मध्यम नियंत्रण (सेल-फ्री) आणि स्ट्रोमल सेल नियंत्रण केले आणि परिणामांनी दाखवले कीIPHASE-HepatoMax™ आणिIPHASE-HepatoCon™ प्रणालींनी 3 दिवसापासून एक मजबूत पीक मेटाबोलाइट प्रतिसाद निर्माण केला आणि त्या दोघांनी मजबूत चयापचय टर्नओव्हर दर दर्शविला.

 

 

• (२)औषध चयापचय मुख्यतः हेपॅटोसाइटवर अवलंबून असतेCYP450सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य प्रणाली, आणि त्याची क्रिया चांगल्या प्रकारे तपासण्यासाठी मोजली जाऊ शकते.

दIPHASE-HepatoMax™ आणिIPHASE-HepatoCon™ सिस्टम्समध्ये चांगली लागू आहे.

IPHASE ने मध्यम नियंत्रण (कोणतेही सेल नाही), HepatoMax™, HepatoCon™ आणि स्ट्रोमल पेशींच्या चार श्रेणी सेट केल्या. भिंत वापरणे-अनुयायी प्राथमिक मानवहिपॅटोसाइटs उदाहरण म्हणून, मेटाबोलाइटची मूल्ये वाढवतातCYP1A2, CYP2B6आणिCYP3A4दिवस 0, 3 आणि 7 नंतर सत्यापित केले गेलेहिपॅटोसाइटअनुक्रमे फिनास्टेराइड, बुप्रोपियन आणि मिडाझोलमचा सब्सट्रेट म्हणून वापर करून 3 दिवसांसाठी पुनर्प्राप्ती. चयापचय वाढ मूल्ये दोन्ही दाखवलेIPHASE-HepatoMax™ आणिIPHASE-HepatoCon™ प्रणालींनी 7 व्या दिवसापर्यंत सक्रिय एंजाइम क्रियाकलाप दर्शविला, सातत्याने सामान्य औषध चयापचयला प्रोत्साहन दिले.

 

• (३) एंझाइम क्रियाकलापांच्या प्रमाणीकरणाव्यतिरिक्त, चांगली चयापचय स्थिरता देखील इन विट्रो मॉडेल्सची उपयुक्तता प्रमाणित करण्यासाठी एक महत्त्वपूर्ण आणि अपरिहार्य पाऊल आहे.

IPHASE ने HepatoMax™, HepatoCon™ आणि स्ट्रोमल पेशींच्या तीन श्रेणी सेट केल्या आहेत ज्यामुळे टोलबुटिमाईडची चयापचय स्थिरता 80 तासांच्या कालावधीत निर्धारित केली गेली आहे, उदाहरणार्थ अनुयायी प्राथमिक मानवी हेपॅटोसाइट्स वापरून, जे प्राथमिक पुनरुत्थानानंतर 3 दिवसांनी प्रशासित केले गेले.हिपॅटोसाइटs, आणि परिणामांनी दाखवले की दोन्हीIPHASE-HepatoMax™ आणिIPHASE-HepatoCon™ दोन्ही प्रणालींनी परख वेळेच्या प्रदीर्घ मूल्यामध्ये मजबूत चयापचय क्लिअरन्स क्रियाकलाप दर्शविला.

 

सारांश, आयपीएचएएसई, इन विट्रो बायो-रीएजंट्सचा नेता म्हणून विकसित झाला आहेIphase HepatoMax™ आणिIphase HepatoCon™ भिंतीवर आधारित इन विट्रो मॉडेल-प्राथमिक मानव, माकड, कुत्रा, उंदीर आणि उंदीर लागूहिपॅटोसाइटउत्कृष्ट चयापचय उलाढाल, सक्रिय एन्झाइम क्रियाकलाप आणि शक्तिशाली चयापचय क्लीयरन्स क्रियाकलापांसह विविध पिढीतील s आणि स्ट्रोमल पेशी, जे आमच्या ग्राहकांना कमी-क्लिअरन्स औषधे विकसित करण्यासाठी नवीन पर्याय देतात आणि औषध शोध साकारण्यासाठी एक अपरिहार्य भागीदार आहेत! दIphase HepatoMax™ आणिIphase HepatoCon™ इन विट्रो मॉडेल्स उत्कृष्ट चयापचय टर्नओव्हर दर, सक्रिय एन्झाइम क्रियाकलाप आणि मजबूत चयापचय क्लिअरन्स क्रियाकलाप देतात, ग्राहकांना कमी-क्लिअरन्स औषधे विकसित करण्यासाठी नवीन पर्याय प्रदान करतात आणि औषध शोधातील एक महत्त्वपूर्ण भागीदार आहेत!

 

संदर्भ:

[१]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.

[२] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. कमी-क्लिअरन्स व्हॅल्यू[जे] ठरवण्यासाठी एक नवीन रिले पद्धत. औषध चयापचय आणि स्वभाव, 2012, 40(9): 1860-1865.