ناول ان وٹرو ہیپاٹوسیٹ میٹابولزم ماڈل سست-میٹابولائزنگ فارماکوکینیٹک اسٹڈیز کو سہولت فراہم کرتا ہے

چونکہ ان وٹرو انکیوبیشن ٹائم کے طول کے ساتھ دوائیوں کے میٹابولائزنگ انزائم کی سرگرمیاں بتدریج کم ہوتی جاتی ہیں، اس لیے روایتی ان وٹرو میٹابولزم ماڈلز کی حدود ہوتی ہیں جیسے مختصر انکیوبیشن ٹائم، کم میٹابولک تبادلوں اور پتہ لگانے کی اعلی نچلی حد (کلنٹ پرکھ کی مقداری نچلی حد 2.5 μL·1) ہے، جو پہلے سے 6 سیلز نہیں کر سکتے۔ آہستہ آہستہ میٹابولائزڈ دوائیوں کا^[1]. دریں اثنا،hepatocytes کے مقابلے میں آکسیکرن، کمی، ہائیڈولیسس اور dimerization کے رد عمل کے لیے زیادہ انزائمز کی ضرورت ہوتی ہے۔جگر کے مائکروسومس، اور وٹرو سسٹم میں، بہت سے نئے ماڈلز کی بنیاد پر بہتر بنائے جاتے ہیں۔hepatocyte سسٹم اور مزید انزائم کی سرگرمی کو برقرار رکھنے کے لئے ان ویوو ماحول کی نقل کرتا ہے۔hepatocytes، اور انکیوبیشن کے وقت کو طول دینا سست میٹابولائزنگ ادویات کی کافی میٹابولک تبدیلی کی نگرانی کرنے کا امکان فراہم کرتا ہے۔^[1،2].

اس کے پیش نظر، آئی پی ایچ اے ایس ای نے وٹرو ریسرچ کے لیے بائیولوجیکل ریجنٹس میں رہنما کے طور پر HepatoMax™ سسٹم اور HepatoCon™ میڈیا سسٹم کا آغاز کیا ہے جس پر مبنی بنیادی ہیپاٹوسائٹس اور مختلف نسلوں کے سٹرومل خلیات بشمول انسان، بندر، کینائن، چوہا، اور ماؤس وغیرہ کے مطالعہ پر مبنی ہے۔ انسانhepatocytes ایک مثال کے طور پر، اور دونوں نظام مخصوص انزائم کی اقسام کی سرگرمی اور میٹابولک استحکام کے تعین کے لیے اور نظام کی تصدیق کے لیے 10 دن اور 7 دن میں دوائی ٹولبوٹامائیڈ کے میٹابولائٹس کی رسپانس ویلیو میں اضافے کے لیے قائم کیے گئے تھے۔ میٹابولائٹ نے 10 دن میں ردعمل کی قیمت میں اضافہ کیا اور 7 دنوں میں مخصوص انزائم کی قسموں کی سرگرمی اور میٹابولک استحکام کو نظام کی توثیق کرنے کا عزم کیا گیا۔

• (1) دو منظم منشیات کی توثیق کلچر کے عمل مندرجہ ذیل ہیں:

  IPHASE-HepatoMax™منجمد دیواروں والے بنیادی انسانی ہیپاٹوسائٹس اور سٹرومل خلیوں کا ایک شریک ثقافتی نظام ہے۔ پرائمری انسانی ہیپاٹوسائٹس کو دوائیوں کی انتظامیہ پرکھ شروع کرنے کے لیے 3 دن کے لیے HepatoP™ میڈیم میں سٹرومل سیلز کے ساتھ دوبارہ زندہ کیا گیا اور دوا کا میٹابولزم سیرم فری HepatoDo™ میڈیم میں کیا گیا، جسے میڈیم کو تبدیل کیے بغیر صرف دوا سے بھر دیا گیا۔ منشیات کی انتظامیہ کے 4، 72، 168 اور 240 گھنٹے بعد، تجزیہ کے لیے منشیات کے میٹابولائٹس کی ویلیو ایڈڈ کا تعین کیا گیا۔

 

  IPHASE-HepatoCon™دوسری طرف، HepatoCon™ میڈیم میں منجمد پیروکار بنیادی انسانی ہیپاٹوسائٹس کی ثقافت کا ایک نظام ہے۔ بنیادی انسان کو دوبارہ زندہ کرنے کے بعدhepatocytes، منشیات کی انتظامیہ پرکھ صرف HepatoCon™ میڈیم میں کلچر کے 3 دن کے بعد انجام دی گئی تھی، اور انتظامیہ کے بعد کا وقت، کلچر سسٹم اور پرکھ کا طریقہ وہی تھا جو HepatoMax™ سسٹم کا تھا۔

 

دریں اثنا، نتائج کی درستگی اور سختی کو یقینی بنانے کے لیے، آئی پی ایچ اے ایس ای نے ایک ہی وقت میں ایک میڈیم کنٹرول (سیلIPHASE-HepatoMax™ اورIPHASE-HepatoCon™ سسٹمز نے 3 دن کے بعد سے ایک مضبوط چوٹی میٹابولائٹ ردعمل پیدا کیا، اور یہ کہ دونوں نے مضبوط میٹابولک ٹرن اوور کی شرح ظاہر کی۔

 

 

• (2) منشیات کا میٹابولزم بنیادی طور پر ہیپاٹوسائٹ پر منحصر ہے۔CYP450ینجائم نظام، اور اس کی سرگرمی کو بہتر جانچنے کے لیے ماپا جا سکتا ہے۔

دیIPHASE-HepatoMax™ اورIPHASE-HepatoCon™ نظاموں میں اچھی قابل اطلاق ہے۔

آئی پی ایچ اے ایس ای نے میڈیم کنٹرول (کوئی سیلز نہیں)، HepatoMax™، HepatoCon™ اور سٹرومل سیلز کی چار قسمیں ترتیب دیں۔ دیوار کا استعمال کرتے ہوئے - پیروکار بنیادی انسانhepatocytes مثال کے طور پر، میٹابولائٹ کی قدروں میں اضافہ ہوتا ہے۔CYP1A2, CYP2B6اورCYP3A4دن 0، 3 اور 7 کے بعد تصدیق کی گئی۔hepatocyteبالترتیب سبسٹریٹس کے طور پر فائنسٹرائیڈ، بیوپروپین اور مڈازولم کا استعمال کرتے ہوئے 3 دن تک صحت یابی۔ میٹابولائٹ میں اضافہ اقدار سے ظاہر ہوتا ہے کہ دونوںIPHASE-HepatoMax™ اورIPHASE-HepatoCon™ سسٹمز نے 7 دن تک فعال انزائم سرگرمی ظاہر کی، مستقل طور پر منشیات کے عام میٹابولزم کو فروغ دیا۔

 

• (3) انزائم کی سرگرمی کی توثیق کے علاوہ، اچھی میٹابولک استحکام بھی ان وٹرو ماڈلز کی افادیت کو درست کرنے میں ایک اہم اور ناگزیر قدم ہے۔

IPHASE نے HepatoMax™، HepatoCon™ اور stromal خلیات کی تین اقسام قائم کیں تاکہ 80 گھنٹے کی مدت میں Tolbutimide کی میٹابولک استحکام کا تعین کیا جا سکے، مثال کے طور پر ایڈورنٹ پرائمری ہیومن ہیپاٹوسائٹس کا استعمال کرتے ہوئے، جن کا انتظام پرائمری کی بحالی کے 3 دن بعد کیا گیا تھا۔hepatocytes، اور نتائج سے ظاہر ہوا کہ دونوںIPHASE-HepatoMax™ اورIPHASE-HepatoCon™ دونوں نظاموں نے پرکھ کے وقت کی طویل ترین قیمت کے اندر مضبوط میٹابولک کلیئرنس سرگرمی دکھائی۔

 

خلاصہ یہ کہ آئی پی ایچ اے ایس ای، وٹرو بائیو ریجنٹس میں ایک رہنما کے طور پر تیار ہوا ہے۔Iphase HepatoMax™ اورIPHASE HepatoCon™ دیوار پر مبنی ان وٹرو ماڈلز پرائمری انسان، بندر، کینائن، چوہا اور ماؤس کا اطلاق ہوتا ہے۔hepatocyteبہترین میٹابولک ٹرن اوور، فعال انزائم سرگرمیوں اور طاقتور میٹابولک کلیئرنس سرگرمیوں کے ساتھ مختلف نسلوں کے s اور سٹرومل سیلز، جو ہمارے صارفین کے لیے کم-کلیئرنس دوائیں تیار کرنے کے لیے نئے انتخاب پیش کرتے ہیں، اور منشیات کی دریافت کا احساس کرنے کے لیے ایک ناگزیر پارٹنر ہیں! دیIphase HepatoMax™ اورIPHASE HepatoCon™ ان وٹرو ماڈلز بہترین میٹابولک ٹرن اوور ریٹ، فعال انزائم سرگرمیاں اور مضبوط میٹابولک کلیئرنس سرگرمیاں پیش کرتے ہیں، جو صارفین کو کم-کلیئرنس دوائیں تیار کرنے کے لیے نئے اختیارات فراہم کرتے ہیں، اور منشیات کی دریافت میں ایک اہم شراکت دار ہیں!

 

حوالہ:

[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报، 2019(2):152-160۔

[2] Di L، Trapa P، Obach R S، et al. کم ڈرگ میٹابولزم اینڈ ڈسپوزیشن، 2012، 40(9): 1860-1865۔