Kwa kuwa shughuli za kimetaboliki za dawa hupungua polepole kwa kuongezeka kwa muda wa incubation ya vitro, mifano ya kawaida ya kimetaboliki katika vitro ina mapungufu kama vile muda mfupi wa incubation, ubadilishaji wa chini wa kimetaboliki na kiwango cha juu cha utambuzi (kikomo cha chini cha CLint assay ni 2.5 μL /( min·106 seli)), ambayo haiwezi kutabiriwa kwa usahihi wa madawa ya kulevya polepole.[1]. Wakati huo huo,hepatocyteWana vimeng'enya zaidi vinavyohitajika kwa oxidation, kupunguza, hidrolisisi na athari za dimerization ikilinganishwa namicrosomes ya ini, na mifumo ya ndani, mifano mingi ya riwaya huwa na kuboreshwa kulingana nahepatocyte mfumo na kuiga zaidi mazingira ya vivo ili kuongeza muda wa uhifadhi wa shughuli ya kimeng'enya ndanihepatocytes, na kupanuka kwa muda wa incubation kunatoa uwezekano wa kufuatilia mabadiliko ya kutosha ya kimetaboliki ya dawa za kupunguza kasi ya metabolizing.[1,2].
Kwa kuzingatia hili, IPHASE, kama kiongozi katika vitendanishi vya kibaolojia kwa ajili ya utafiti wa ndani, imeanzisha Mfumo wa HepatoMax™ na Mfumo wa Vyombo vya Habari wa HepatoCon™ kulingana na uchunguzi wa hepatocytes msingi na seli za stromal za genera mbalimbali, ikiwa ni pamoja na binadamu, tumbili, mbwa, panya, na panya, nk.hepatocytes kama mfano, na mifumo yote miwili ilianzishwa kwa ajili ya kuamua shughuli na utulivu wa kimetaboliki wa aina maalum za enzyme na ongezeko la thamani ya majibu ya metabolites ya tolbutamide ya madawa ya kulevya kwa siku 10 na siku 7 ili kuthibitisha mifumo. Thamani ya majibu ya metabolite kwa siku 10 na shughuli na utulivu wa kimetaboliki wa aina maalum za enzyme katika siku 7 ziliamua kuthibitisha mifumo.
- (1) Michakato miwili ya kitamaduni ya uthibitishaji wa dawa ni kama ifuatavyo:
IPHASE-HepatoMax™ni mfumo wa kitamaduni wa hepatocyte za msingi za binadamu zilizogandishwa na seli za stromal. Hepatocytes ya msingi ya binadamu ilifufuliwa na kuingizwa na seli za stromal katika kati ya HepatoP™ kwa siku 3 ili kuanza majaribio ya utawala wa madawa ya kulevya, na kimetaboliki ya dawa ilifanywa katika serum-bure HepatoDo™ medium, ambayo ilijazwa tena na dawa bila kubadilisha kati. Jumla ya saa 4, 72, 168 na 240 baada ya utawala wa madawa ya kulevya, thamani iliyoongezwa ya metabolites ya madawa ya kulevya ilitambuliwa kwa uchambuzi.
IPHASE-HepatoCon™, kwa upande mwingine, ni mfumo wa kukuza hepatosaiti za msingi za binadamu zilizoganda kwenye HepatoCon™ medium. Baada ya kufufua binadamu wa msingihepatocytes, jaribio la usimamizi wa dawa lilifanywa baada ya siku 3 za utamaduni katika HepatoCon™ medium pekee, na wakati uliofuata wa usimamizi, mfumo wa kitamaduni na mbinu ya kupima zilikuwa sawa na zile za mfumo wa HepatoMax™.
Wakati huo huo, ili kuhakikisha usahihi na ukali wa matokeo, IPHASE ilifanya udhibiti wa kati (seli-bure) na udhibiti wa seli ya stromal kwa wakati mmoja, na majibu matatu, na matokeo yalionyesha kuwaIPHASE-HepatoMax™ naIPHASE-HepatoCon™ mifumo ilitoa mwitikio mkubwa wa metabolite kutoka siku ya 3 na kuendelea, na kwamba zote mbili zilionyesha kiwango kikubwa cha mauzo ya kimetaboliki.
- (2)Umetaboli wa madawa ya kulevya unategemea sana hepatocyteCYP450mfumo wa enzyme, na shughuli zake zinaweza kupimwa ili kuchunguza vizuri.
TheIPHASE-HepatoMax™ naIPHASE-HepatoCon™ mifumo ina utumiaji mzuri.
IPHASE ilianzisha aina nne za udhibiti wa kati (hakuna seli), HepatoMax™, HepatoCon™ na seli za stromal. Kwa kutumia ukuta-binadamu msingi mfuasihepatocytes kama mfano, metabolite huongeza maadili yaCYP1A2, CYP2B6naCYP3A4zilithibitishwa siku ya 0, 3 na 7 baada ya hapohepatocytekupona kwa siku 3 kwa kutumia finasteride, bupropion na midazolam kama sehemu ndogo, mtawalia. Thamani za ongezeko la metabolite zilionyesha kuwa zote mbiliIPHASE-HepatoMax™ naIPHASE-HepatoCon™ mifumo ilionyesha shughuli ya kimeng'enya ifikapo siku ya 7, ikiendelea kukuza kimetaboliki ya kawaida ya dawa.
- (3)Mbali na uthibitishaji wa shughuli za kimeng'enya, uthabiti mzuri wa kimetaboliki pia ni hatua muhimu na ya lazima katika kuhalalisha matumizi ya mifano ya vitro.
IPHASE ilianzisha aina tatu za HepatoMax™, HepatoCon™ na seli za stromal ili kubaini uthabiti wa kimetaboliki ya Tolbutimide kwa muda wa saa 80 kwa kutumia hepatocyte za msingi za binadamu kama mfano, ambazo zilisimamiwa siku 3 baada ya kufufuliwa kwa msingi.hepatocytes, na matokeo yalionyesha kuwa zote mbiliIPHASE-HepatoMax™ naIPHASE-HepatoCon™ mifumo yote miwili ilionyesha shughuli thabiti ya kibali cha kimetaboliki ndani ya thamani ndefu zaidi ya muda wa majaribio.
Kwa muhtasari, IPHASE, kama kiongozi katika vitro biolojia-vitendanishi, imeundwaIPHASE HepatoMax™ naIPHASE HepatoCon™ miundo ya ndani kulingana na ukuta-iliyotumika binadamu, tumbili, mbwa, panya na panyahepatocyteseli na stromal za genera mbalimbali, zenye mauzo bora ya kimetaboliki, shughuli za kimeng'enya na shughuli za nguvu za uondoaji kimetaboliki, ambazo hutoa chaguo mpya kwa wateja wetu kutengeneza dawa zisizo na kibali cha chini, na ni mshirika wa lazima katika kugundua dawa! TheIPHASE HepatoMax™ naIPHASE HepatoCon™ mifano ya in vitro hutoa viwango bora vya mauzo ya kimetaboliki, shughuli za kimeng'enya na shughuli kali za kibali cha kimetaboliki, kutoa chaguo mpya kwa wateja kutengeneza-dawa za kibali cha chini, na ni mshirika muhimu katika ugunduzi wa dawa!
Rejeleo:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.大清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进中展展[J]. 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Mbinu ya upeanaji riwaya ya kubainisha maadili ya chini-ya kibali[J]. Umetaboli wa dawa na tabia, 2012, 40(9): 1860-1865.
Muda wa kutuma: 2024-07-19 17:20:41