Пошто активности ензима који метаболишу лек постепено опадају са продужењем времена ин витро инкубације, традиционални ин витро модели метаболизма имају ограничења као што су кратко време инкубације, ниска метаболичка конверзија и висока доња граница детекције (квантитативна доња граница ЦЛинт теста је 2,5 μЛ /(мин·106 метаболичких ћелија)), што може предвидети да се лек не може прецизно метаболисати.[1]. у међувремену,хепатоцитас имају више ензима потребних за реакције оксидације, редукције, хидролизе и димеризације у поређењу самикрозоми јетре, и у ин витро системима, многи нови модели имају тенденцију да се оптимизују на основухепатоцита систем и даље опонаша ин виво окружење како би се продужило задржавање активности ензима ухепатоцитас, а продужење времена инкубације пружа могућност праћења довољне метаболичке трансформације споро метаболичких лекова[1,2].
С обзиром на то, ИПХАСЕ, као лидер у биолошким реагенсима за ин витро истраживања, увео је ХепатоМак™ систем и ХепатоЦон™ Медиа Систем на основу проучавања адхерентних примарних хепатоцита и стромалних ћелија различитих родова, укључујући људе, мајмуне, псе, пацове и мишеве, итд. Примарни систем Хепатомак™ развијен је од стране Хепатомак™ система за људе.хепатоцитас као пример, а оба система су постављена за одређивање активности и метаболичке стабилности специфичних типова ензима и повећање вредности одговора метаболита лека толбутамид на 10 дана и 7 дана да би се верификовали системи. Вредност одговора повећања метаболита за 10 дана и активност и метаболичка стабилност специфичних типова ензима за 7 дана су одређене да би се потврдили системи.
- (1) Два систематска процеса културе валидације лекова су следећа:
ИПХАСЕ-ХепатоМак™је систем кокултуре замрзнутих примарних људских хепатоцита и стромалних ћелија. Примарни хумани хепатоцити су оживљени и инкубирани са стромалним ћелијама у ХепатоП™ медијуму 3 дана да би се започело испитивање примене лека, а метаболизам лека је спроведен у ХепатоДо™ медијуму без серума, који је допуњен само леком без промене медијума. Укупно 4, 72, 168 и 240 сати након примене лека, одређена је додата вредност метаболита лека за анализу.
ИПХАСЕ-ХепатоЦон™, са друге стране, је систем за култивисање замрзнутих адхерентних примарних хуманих хепатоцита у ХепатоЦон™ медијуму. Након реанимације примарног човекахепатоцитас, тест примене лека је изведен након 3 дана култивисања само у ХепатоЦон™ медијуму, а накнадно време примене, систем културе и методологија анализе били су исти као они за ХепатоМак™ систем.
У међувремену, да би се осигурала тачност и ригорозност резултата, ИПХАСЕ је извршио контролу медијума (без ћелија) и контролу стромалних ћелија у исто време, са три понављања, а резултати су показали даИПХАСЕ-ХепатоМак™ иИПХАСЕ-ХепатоЦон™ системи су произвели снажан вршни одговор метаболита од 3. дана па надаље, и да су оба показала јаку стопу метаболичког обрта.
- (2) Метаболизам лека углавном зависи од хепатоцитаЦИП450ензимског система, а његова активност се може мерити ради бољег испитивања.
ТхеИПХАСЕ-ХепатоМак™ иИПХАСЕ-ХепатоЦон™ системи имају добру применљивост.
ИПХАСЕ је поставио четири категорије контроле медијума (без ћелија), ХепатоМак™, ХепатоЦон™ и стромалне ћелије. Користећи-примарног човека који се држи зидахепатоцитас као пример, метаболит повећава вредности одЦИП1А2, ЦИП2Б6иЦИП3А4су верификовани на дан 0, 3 и 7 наконхепатоцитаопоравак током 3 дана коришћењем финастерида, бупропиона и мидазолама као супстрата, респективно. Вредности повећања метаболита показале су да обаИПХАСЕ-ХепатоМак™ иИПХАСЕ-ХепатоЦон™ системи су показали активну активност ензима до 7. дана, доследно промовишући нормалан метаболизам лека.
- (3) Поред валидације активности ензима, добра метаболичка стабилност је такође важан и неопходан корак у валидацији корисности ин витро модела.
ИПХАСЕ је поставио три категорије ХепатоМак™, ХепатоЦон™ и стромалних ћелија како би одредио метаболичку стабилност толбутимида у периоду од 80 сати користећи прирасле примарне људске хепатоците као пример, који су давани 3 дана након реанимације примарногхепатоцитас, а резултати су показали да су обаИПХАСЕ-ХепатоМак™ иИПХАСЕ-ХепатоЦон™ оба система су показала снажну метаболичку активност клиренса унутар најдуже вредности времена анализе.
Укратко, ИПХАСЕ, као лидер у ин витро био-реагенсима, се развиоИПХАСЕ ХепатоМак™ иИПХАСЕ ХепатоЦон™ ин витро модели засновани на примарним-примењеним људима, мајмунима, псима, пацовима и мишимахепатоцитас и стромалних ћелија различитих родова, са одличним метаболичким прометом, активним ензимским активностима и моћним метаболичким активностима чишћења, које нуде нове изборе нашим купцима да развију лекове са ниским-клиренсом, и незаменљив су партнер за откривање лекова! ТхеИПХАСЕ ХепатоМак™ иИПХАСЕ ХепатоЦон™ ин витро модели нуде одличне стопе метаболичког обрта, активне ензимске активности и снажне метаболичке активности чишћења, пружајући нове могућности купцима да развију лекове са ниским-клиренсом, и важан су партнер у откривању лекова!
Референца:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[Ј].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Ди Л, Трапа П, Обацх Р С, ет ал. Нова метода релеја за одређивање ниских-вредности зазора[Ј]. Метаболизам и диспозиција лекова, 2012, 40(9): 1860-1865.
Пост тиме: 2024-07-19 17:20:41