Ĉar la drogaj metaboligaj enzimaj aktivecoj iom post iom malpliiĝas kun la plilongigo de in vitro-inkubacia tempo, tradiciaj en vitro-metabolaj modeloj havas limigojn kiel mallongan kovadon, malaltan metabolan konvertiĝon kaj altan malsupran limon de detekto (la kvanta malsupera limo de CLint-analizo estas 2.5 μL /( min·106 ĉeloj)), kiuj ne povas precize antaŭdiri CLint de malrapide metaboligitaj drogoj.[1]. Dume,hepatocitos havas pli da enzimoj necesaj por oksigenado, redukto, hidrolizo kaj dimerigaj reagoj kompare kunhepataj mikrosomoj, kaj en en vitro sistemoj, multaj novaj modeloj tendencas esti optimumigitaj surbaze de lahepatocito sistemo kaj plue imiti la envivan medion por plilongigi la retenon de enzimaktiveco enhepatocitos, kaj la plilongigo de la kovada tempo donas la eblecon kontroli sufiĉan metabolan transformon de malrapidaj metaboligaj drogoj.[1,2].
Konsiderante ĉi tio, IPHASE, kiel gvidanto en biologiaj reakciiloj por en vitro-esplorado, iniciatis la HepatoMax™ Sistemon kaj HepatoCon™ Media System bazitajn sur la studo de adheraj primaraj hepatocitoj kaj stromaj ĉeloj de diversaj genroj, inkluzive de homa, simio, hundo, rato kaj muso, ktp.hepatocitos kiel ekzemplo, kaj ambaŭ sistemoj estis starigitaj por la determino de la aktiveco kaj metabola stabileco de specifaj enzimaj tipoj kaj la pliiĝo en respondvaloro de metabolitoj de la drogo tolbutamide je 10 tagoj kaj 7 tagoj por kontroli la sistemojn. Metabolito pliigas respondvaloron je 10 tagoj kaj aktiveco kaj metabola stabileco de specifaj enzimspecoj je 7 tagoj estis determinitaj validigi la sistemojn.
- (1) La du sistemaj drog-validigaj kulturprocezoj estas jenaj:
IPHASE-HepatoMax™estas kunkultura sistemo de frostmuraj primaraj homaj hepatocitoj kaj stromaj ĉeloj. Primaraj homaj hepatocitoj estis revivigitaj kaj kovataj kun stromaj ĉeloj en medio HepatoP™ dum 3 tagoj por komenci la provon pri administrado de drogoj, kaj la metabolo de la drogo estis efektivigita en medio HepatoDo™ serum-libera, kiu estis replenigita nur per la drogo sen ŝanĝi la medion. Entute 4, 72, 168 kaj 240 horojn post administrado de drogo, la aldonita valoro de drogmetabolitoj estis determinita por analizo.
IPHASE-HepatoCon™, aliflanke, estas sistemo por kulturado de frostaj adheraj primaraj homaj hepatocitoj en HepatoCon™-medio. Post revivigado de la primara homohepatocitos, la analizo pri administrado de drogoj estis farita post 3 tagoj da kulturo en medio HepatoCon™ sole, kaj la posta tempo de administrado, la kultursistemo kaj la analizmetodaro estis la sama kiel tiuj de la sistemo HepatoMax™.
Dume, por certigi la precizecon kaj rigoron de la rezultoj, IPHASE realigis mezan kontrolon (ĉelo-senpaga) kaj stromalĉelan kontrolon samtempe, kun tri repigoj, kaj la rezultoj montris, ke laIPHASE-HepatoMax™ kajIPHASE-HepatoCon™ sistemoj produktis fortan pintan metabolitrespondon de la tago 3 pluen, kaj ke ili ambaŭ montris fortan metabolan spezorapidecon.
- (2) La metabolo de drogoj dependas ĉefe de la hepatocitoCYP450enzimsistemo, kaj ĝia agado povas esti mezurita por pli bone ekzameni.
LaIPHASE-HepatoMax™ kajIPHASE-HepatoCon™ sistemoj havas bonan aplikeblecon.
IPHASE starigis kvar kategoriojn de meza kontrolo (sen ĉeloj), HepatoMax™, HepatoCon™ kaj stromaj ĉeloj. Uzante muro-adheran primaran homonhepatocitos ekzemple, la metabolito pliigas valorojn deCYP1A2, CYP2B6kajCYP3A4estis kontrolitaj je la tago 0, 3 kaj 7 postehepatocitoreakiro dum 3 tagoj uzante finasteridon, bupropionon kaj midazolamon kiel la substratojn, respektive. Metabolitaj plialtvaloroj montris, ke ambaŭIPHASE-HepatoMax™ kajIPHASE-HepatoCon™ sistemoj montris aktivan enziman agadon je la 7-a tago, konstante antaŭenigante normalan drogmetabolon.
- (3) Krom la validigo de enzima aktiveco, bona metabola stabileco ankaŭ estas grava kaj nemalhavebla paŝo por validigi la utilecon de en vitro-modeloj.
IPHASE starigis tri kategoriojn da HepatoMax™, HepatoCon™ kaj stromaj ĉeloj por determini la metabolan stabilecon de Tolbutimide dum periodo de 80 horoj uzante adherajn primarajn homajn hepatocitojn kiel ekzemplon, kiuj estis administritaj 3 tagojn post reanimado de primaraj.hepatocitos, kaj la rezultoj montris, ke ambaŭ laIPHASE-HepatoMax™ kajIPHASE-HepatoCon™ sistemoj ambaŭ montris fortikan metabolan puran agadon ene de la plej longa valoro de la analiztempo.
En resumo, IPHASE, kiel gvidanto en in vitro bio-reakciiloj, formiĝisIPHASE HepatoMax™ kajIPHASE HepatoCon™ en vitro modeloj bazitaj sur muro-aplikita primara homo, simio, hundo, rato kaj musohepatocitos kaj stromaj ĉeloj de diversaj genroj, kun bonega metabola spezo, aktivaj enzimaj aktivecoj kaj potencaj metabolaj purigaj agadoj, kiuj ofertas novajn elektojn por niaj klientoj por disvolvi malaltajn-purigajn drogojn, kaj estas nemalhavebla partnero por realigi drog-malkovron! LaIPHASE HepatoMax™ kajIPHASE HepatoCon™ en vitro-modeloj ofertas bonegajn metabolajn spezajn indicojn, aktivajn enzimajn agadojn kaj fortajn metabolajn purigajn agadojn, provizante novajn eblojn por klientoj por evoluigi malaltajn-purigajn drogojn, kaj estas grava partnero en drog-malkovro!
Referenco:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Nova relajsmetodo por determini malaltajn-malbarajn valorojn[J]. Drogmetabolo kaj dispono, 2012, 40(9): 1860-1865.
Afiŝtempo: 2024-07-19 17:20:41