Бидејќи метаболизирачките ензимски активности на лекот постепено се намалуваат со продолжување на ин витро времето на инкубација, традиционалните ин витро модели на метаболизам имаат ограничувања како што се кратко време на инкубација, ниска метаболичка конверзија и висока долна граница на откривање (квантитативната долна граница на анализата CLint е 2,5 μL / (мин. · 106 клетки) кои не можат прецизно да ги одредат метаболизираните лекови.[1]. Во меѓувреме,хепатоцитиимаат повеќе ензими потребни за реакции на оксидација, редукција, хидролиза и димеризација во споредба сомикрозоми на црниот дроб, и ин витро системи, многу нови модели имаат тенденција да се оптимизираат врз основа нахепатоцити систем и дополнително имитираат in vivo средина за да се продолжи задржувањето на ензимската активност вохепатоцитиs, а продолжувањето на времето на инкубација дава можност за следење на доволна метаболичка трансформација на бавните метаболизирачки лекови[1,2].
Со оглед на ова, IPHASE, како лидер во биолошките реагенси за ин витро истражување, го пионерираше системот HepatoMax™ и медиумскиот систем HepatoCon™ врз основа на проучување на прилепени примарни хепатоцити и стромални клетки од различни родови, вклучувајќи луѓе, мајмуни, кучиња, стаорци и глушеци, итн.хепатоцитиs како пример, и двата системи беа поставени за одредување на активноста и метаболичката стабилност на специфичните типови на ензими и зголемувањето на вредноста на одговорот на метаболитите на лекот толбутамид на 10 дена и 7 дена за да се потврдат системите. Метаболитот ја зголемува вредноста на одговорот на 10 дена и активноста и метаболичката стабилност на специфичните типови на ензими на 7 дена беа одредени за да се потврдат системите.
- (1) Двата систематски процеси на култура за валидација на лекот се како што следува:
IPHASE-HepatoMax™е ко-културен систем на замрзнати ѕидови примарни човечки хепатоцити и стромални клетки. Примарните човечки хепатоцити беа реанимирани и инкубирани со стромални клетки во медиумот HepatoP™ 3 дена за да се започне со анализата за администрирање на лекот, а метаболизмот на лекот беше спроведен во серум-слободен HepatoDo™ медиум, кој беше надополнет само со лекот без промена на медиумот. Вкупно 4, 72, 168 и 240 часа по администрацијата на лекот, за анализа е одредена додадената вредност на метаболитите на лекот.
IPHASE-HepatoCon™, од друга страна, е систем за култивирање на замрзнати прилепени примарни човечки хепатоцити во медиум HepatoCon™. По реанимација на примарниот човекхепатоцитиs, анализата за администрирање на лекот беше изведена по 3 дена одгледување само во медиум HepatoCon™, а последователното време на администрација, системот на култура и методологијата на анализа беа исти како оние на системот HepatoMax™.
Во меѓувреме, за да се осигури точноста и строгоста на резултатите, IPHASE изврши средна контрола (ќелија-без) и контрола на стромални клетки истовремено, со три повторувања, а резултатите покажаа декаIPHASE-HepatoMax™ иIPHASE-HepatoCon™ системите произведоа силен врвен одговор на метаболитите од 3-тиот ден наваму, и дека и двата покажаа силна стапка на метаболички обрт.
- (2) Метаболизмот на лековите главно зависи од хепатоцититеCYP450ензимски систем, а неговата активност може да се измери за подобро да се испита.
НаIPHASE-HepatoMax™ иIPHASE-HepatoCon™ системите имаат добра применливост.
IPHASE постави четири категории на медиум контрола (без клетки), HepatoMax™, HepatoCon™ и стромални клетки. Користење на ѕид-адхерентен примарен човекхепатоцитиs како пример, метаболитот ги зголемува вредностите наCYP1A2, CYP2B6иCYP3A4беа потврдени на 0, 3 и 7 ден потоахепатоцитизакрепнување за 3 дена користејќи финастерид, бупропион и мидазолам како супстрати, соодветно. Зголемените вредности на метаболитите покажаа дека и дветеIPHASE-HepatoMax™ иIPHASE-HepatoCon™ системите покажаа активна ензимска активност до 7-ми ден, постојано промовирајќи го нормалниот метаболизам на лекот.
- (3) Покрај валидацијата на ензимската активност, добрата метаболичка стабилност е исто така важен и неопходен чекор во потврдувањето на корисноста на ин витро моделите.
IPHASE постави три категории на HepatoMax™, HepatoCon™ и стромални клетки за да ја одреди метаболичката стабилност на Tolbutimide во период од 80 часа користејќи прилепени примарни човечки хепатоцити како пример, кои беа администрирани 3 дена по реанимација на примарнатахепатоцитиs, а резултатите покажаа дека и наIPHASE-HepatoMax™ иIPHASE-HepatoCon™ двата система покажаа силна активност на метаболички клиренс во рамките на најдолгата вредност на времето на анализа.
Накратко, IPHASE, како лидер во ин витро био-реагенси, се развиIPHASE HepatoMax™ иIPHASE HepatoCon™ ин витро модели засновани на применет примарен човек, мајмун, куче, стаорец и глушецхепатоцитиs и стромалните клетки од различни родови, со одличен метаболички промет, активни ензимски активности и моќни метаболички активности за клиренс, кои нудат нови избори за нашите клиенти да развијат лекови со низок клиренс и се незаменлив партнер за реализација на откривање лекови! НаIPHASE HepatoMax™ иIPHASE HepatoCon™ in vitro моделите нудат одлични стапки на метаболички промет, активни ензимски активности и силни метаболички активности за клиренс, обезбедувајќи им нови опции за клиентите да развијат лекови со низок-клиренс и се важен партнер во откривањето лекови!
Референца:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019 (2): 152-160.
[2] Ди Л, Трапа П, Обах Р С, и сор. Нов метод на реле за одредување на ниски-клиренсни вредности[J]. Метаболизам и диспозиција на лекови, 2012, 40(9): 1860-1865.
Време на објавување: 2024-07-19 17:20:41