Atès que les activitats enzimàtiques metabolitzadores del fàrmac disminueixen gradualment amb la prolongació del temps d'incubació in vitro, els models tradicionals de metabolisme in vitro tenen limitacions com el temps d'incubació curta, la conversió metabòlica baixa i el límit més baix de detecció (el límit inferior quantitatiu de Clint és de 2,5 µl /(min · 106 cèl·lules)), que no poden predir amb precisió el clint de fàrmacs metabolitzats lentament.[1]. Mentrestant,hepatòcits tenen més enzims necessaris per a les reaccions d’oxidació, reducció, hidròlisi i dimerització en comparació ambMicrosomes hepàticsi en sistemes in vitro, molts nous models solen optimitzar -se en funció delhepatòcit sistema i imitar més l’entorn in vivo per allargar la retenció de l’activitat enzimàtica ahepatòcitS, i la prolongació del temps d’incubació proporciona la possibilitat de controlar la transformació metabòlica suficient de fàrmacs metabolitzadors lents[1,2].
A la vista d’això, l’iPhase, com a líder en reactius biològics per a la investigació in vitro, ha estat pioner en el sistema Hepatomax ™ i el sistema de mitjans Hepatocon ™ basat en l’estudi de l’adherent Hepatòcits i les cèl·lules estromals de diversos gèneres, inclòs el sistema humà, el mico, el caní, la rata i el ratolí, etc. Humà primarihepatòcitS Com a exemple, i tots dos sistemes es van configurar per a la determinació de l’activitat i l’estabilitat metabòlica de tipus enzimàtics específics i l’augment del valor de resposta dels metabòlits del fàrmac tolbutamida als 10 dies i 7 dies per verificar els sistemes. El metabolit augmenta el valor de resposta als 10 dies i l’activitat i l’estabilitat metabòlica dels tipus d’enzims específics als 7 dies es va determinar per validar els sistemes.
- (1) Els dos processos de cultiu de validació sistemàtica són els següents:
IPhase - Hepatomax ™és un sistema de cultiu de hepatòcits humans i de cèl·lules estromals de paret i cèl·lules estromals. Els hepatòcits humans primaris es van reanimar i es van incubar amb cèl·lules estromals al medi Hepatop ™ durant 3 dies per iniciar l’assaig de l’administració de fàrmacs, i el metabolisme del fàrmac es va dur a terme en sèrum - medi Hepatodo ™ lliure, que es va reomplir només amb el fàrmac sense canviar el medi. Un total de 4, 72, 168 i 240 hores després de l’administració de fàrmacs, es va determinar el valor afegit dels metabòlits de fàrmacs per a l’anàlisi.
IPhase - Hepatocon ™D'altra banda, és un sistema per conrear hepatòcits humans adherits congelats al medi Hepatocon ™. Després de reanimar l’ésser primarihepatòcitS, l’assaig de l’administració de fàrmacs es va realitzar després de 3 dies de cultiu en medi Hepatocon ™ sol, i el temps d’administració posterior, el sistema de cultiu i la metodologia d’assaig eren els mateixos que els del sistema Hepatomax ™.
Mentrestant, per assegurar la precisió i el rigor dels resultats, iPhase va realitzar un control mitjà (cèl·lula - lliure) i un control de cèl·lules estromals alhora, amb tres rèpliques, i els resultats van demostrar que elIPhase - Hepatomax ™ iIPhase - Hepatocon ™ Els sistemes van produir una forta resposta al metabolit màxim des del dia 3 en endavant i que tots dos van mostrar una forta taxa de facturació metabòlica.
- (2) El metabolisme de les drogues depèn principalment de l'hepatòcitCYP450El sistema enzimàtic i la seva activitat es poden mesurar per examinar millor.
ElIPhase - Hepatomax ™ iIPhase - Hepatocon ™ Els sistemes tenen una bona aplicabilitat.
IPhase configura quatre categories de control mitjà (sense cèl·lules), Hepatomax ™, Hepatocon ™ i cèl·lules estromals. Utilitzant Wall - Humà primari adherenthepatòcits com a exemple, el metabolit augmenta els valors deCYP1A2, CYP2B6iCYP3A4es van verificar al dia 0, 3 i 7 despréshepatòcitRecuperació durant 3 dies mitjançant Finasteride, Bupropion i Midazolam com a substrats, respectivament. Els valors d'augment de metabolits van demostrar que tots dosIPhase - Hepatomax ™ iIPhase - Hepatocon ™ Els sistemes van mostrar una activitat enzimàtica activa el dia 7, promovent constantment el metabolisme normal dels medicaments.
- (3) A més de la validació de l'activitat enzimàtica, una bona estabilitat metabòlica és també un pas important i indispensable per validar la utilitat dels models in vitro.
IPhase va configurar tres categories de cèl·lules hepatomax ™, hepatocon ™ i estromals per determinar l'estabilitat metabòlica de la tolbutimida durant un període de 80 hores mitjançant hepatòcits humans adherents com a exemple, que es van administrar tres dies després de la reanimació de la primària primària com a exemplehepatòcits, i els resultats van demostrar que tots dosIPhase - Hepatomax ™ iIPhase - Hepatocon ™ Els dos sistemes van mostrar una robusta activitat de depuració metabòlica dins del valor més llarg del temps d'assaig.
En resum, iPhase, com a líder en els reactius in vitro, s'ha desenvolupatIphase hepatomax ™ iIphase hepatocon ™ Models in vitro basats en parets humanes, mico, caní, rates i ratolins aplicatshepatòcitS i cèl·lules estromals de diversos gèneres, amb una excel·lent facturació metabòlica, activitats enzimàtiques actives i potents activitats de depuració metabòlica, que ofereixen noves opcions per als nostres clients per desenvolupar medicaments per a la seva autorització i són un soci indispensable per realitzar el descobriment de fàrmacs. ElIphase hepatomax ™ iIphase hepatocon ™ Els models in vitro ofereixen excel·lents taxes de facturació metabòlica, activitats enzimàtiques actives i activitats fortes metabòliques, proporcionant noves opcions perquè els clients desenvolupin fàrmacs de baix nivell i siguin un soci important en el descobriment de fàrmacs.
Referència:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Un nou mètode de relé per determinar valors de baix nivell [j]. Metabolisme i disposició de les drogues, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Hora del missatge: 2024 - 07 - 19 17:20:41