Since the drug metabolizing enzyme activities gradually decrease with the prolongation of in vitro incubation time, traditional in vitro metabolism models have limitations such as short incubation time, low metabolic conversion and high lower limit of detection (the quantitative lower limit of CLint assay is 2.5 μL /( min·106 cells)), which can not accurately predict CLint of slowly metabolized drugs[1]. In der Zwischenzeit,HepatozyteS haben mehr EnzymeLebermikrosomenund in In -vitro -Systemen werden viele neuartige Modelle basierend auf dem optimiertHepatozyte System und nachahmen die in vivo -Umgebung weiter nach, um die Retention der Enzymaktivität in zu verlängernHepatozyteS und die Verlängerung der Inkubationszeit bietet die Möglichkeit, eine ausreichende Stoffwechseltransformation langsamer metabolisierender Medikamente zu überwachen[1,2].
In Anbetracht dessen hat iPhase als Leiter in biologischen Reagenzien für die In -vitro -Forschung das Hepatomax ™ -System und das Hepatocon ™ -Mediensystem basierend auf der Untersuchung der adhärenten primären Hepatozyten und der Strom -Human -Zellen des HELPATOMAX -Systems und des Hepatokon -Systems, das das HEPATOMAX -System und das HEPATOMAX -System und das HEPATOMAX -System und das HEPATOMAX -System, und das Hepatomal -System und das HEPATOMAX -System, und das Hepatomal -System und das Hepatomax -System und das HEPATOMAX -System, das Hepatomal -System und das HEPATOMAX -System und das Hepatoma -System waren, Pionierarbeit erbracht.HepatozyteS als Beispiel, und beide Systeme wurden zur Bestimmung der Aktivität und metabolischen Stabilität spezifischer Enzymtypen und des Anstiegs des Reaktionswerts von Metaboliten des Arzneimittels Tolbutamid nach 10 Tagen und 7 Tagen eingerichtet, um die Systeme zu verifizieren. Der Reaktionswert des Metabolitenerhöhung bei 10 Tagen und die Aktivität und die Stoffwechselstabilität spezifischer Enzymtypen nach 7 Tagen wurden bestimmt, um die Systeme zu validieren.
- (1) Die beiden systematischen Prozesse für systematische Drogenvalidierung sind wie folgt:
Iphase - hepatomax ™ist ein Kultursystem von gefrorenen primären menschlichen Hepatozyten und Stromazellen. Die primären menschlichen Hepatozyten wurden 3 Tage lang mit Stromazellen in Hepatop ™ -Medium wiederbelebt und inkubiert, um mit dem Medikamentenverwaltungs -Assay zu beginnen, und der Metabolismus des Arzneimittels wurde in Serum - freies Hepatodo ™ -Medium durchgeführt, das nur mit dem Medikament wieder aufgefüllt wurde, ohne das Medium zu ändern. Insgesamt 4, 72, 168 und 240 Stunden nach der Verabreichung von Arzneimitteln wurde der Wert der Arzneimittelmetaboliten für die Analyse bestimmt.
Iphase - hepatocon ™Andererseits ist ein System zur Kultivierung von gefrorenen, anhaftenden primären humanen Hepatozyten in Hepatocon ™ -Medium. Nach Wiederbelebung des primären MenschenHepatozyteS, der Assay der Arzneimittelverwaltung wurde nur nach 3 Tagen Kultur in Hepatocon ™ -Medium durchgeführt, und der anschließende Zeitpunkt der Verabreichung, das Kultursystem und die Assay -Methodik waren die gleichen wie die des Hepatomax ™ -Systems.
Um die Genauigkeit und Strenge der Ergebnisse zu gewährleisten, führte iPhase gleichzeitig eine mittlere Kontrolle (Zelle - frei) und eine Stromazellkontrolle durch, und die Ergebnisse zeigten, dass dieIphase - hepatomax ™ UndIphase - hepatocon ™ Die Systeme produzierten ab Tag 3 eine starke metabolitische Reaktion, und beide zeigten eine starke metabolische Umsatzrate.
- (2) Der Arzneimittelstoffwechsel hängt hauptsächlich von der Hepatozyten abCYP450Das Enzymsystem und seine Aktivität können gemessen werden, um besser zu untersuchen.
DerIphase - hepatomax ™ UndIphase - hepatocon ™ Systeme haben eine gute Anwendbarkeit.
Iphase richtete vier Kategorien von Medienkontrolle (keine Zellen), Hepatomax ™, Hepatocon ™ und Stromazellen ein. Verwenden der Wand - anhaftender primärer MenschHepatozytes als Beispiel erhöhen die Metaboliten die Werte vonCYP1A2, CYP2B6UndCYP3A4wurden am Tag 0, 3 und 7 danach verifiziertHepatozyteWiederherstellung für 3 Tage mit Finasterid, Bupropion und Midazolam als Substrate. Metabolitenerhöhungswerte zeigten, dass beideIphase - hepatomax ™ UndIphase - hepatocon ™ Die Systeme zeigten bis zum 7. Tag eine aktive Enzymaktivität und fördern konsequent den normalen Arzneimittelstoffwechsel.
- (3) Zusätzlich zur Validierung der Enzymaktivität ist eine gute Stoffwechselstabilität auch ein wichtiger und unverzichtbarer Schritt zur Validierung des Nutzens von In -vitro -Modellen.
IPHASE RETORT TREI DREI KATEGOREN DER HEPATOMAX ™, HEPATOCON ™ und StromazellenHepatozytes und die Ergebnisse zeigten, dass beide beideIphase - hepatomax ™ UndIphase - hepatocon ™ Die Systeme zeigten beide eine robuste Aktivität der Stoffwechsel -Clearance innerhalb des längsten Werts der Testzeit.
Zusammenfassend hat sich iPhase als Leiter in In -vitro -Bio -Reagenzien entwickeltIphase hepatomax ™ UndIphase hepatocon ™ In -vitro -Modelle basierend auf der Wand - angewandte primäre Menschen, Affe, Hunde, Ratte und MausHepatozyteS und Stromazellen verschiedener Gattungen mit hervorragendem Stoffwechselumsatz, aktiven Enzymaktivitäten und leistungsstarken Aktivitäten zur Stoffwechsel -Clearance, die unseren Kunden neue Möglichkeiten bieten, niedrige Arzneimittel zu entwickeln, und sind ein unverzichtbarer Partner, um die Entdeckung von Arzneimitteln zu realisieren! DerIphase hepatomax ™ UndIphase hepatocon ™ In -vitro -Modelle bieten hervorragende Stoffwechselfluktuationsraten, aktive Enzymaktivitäten und starke Aktivitäten zur Stoffwechsel -Clearance, die den Kunden neue Optionen für die Entwicklung von Medikamenten mit geringer Clearance bieten und ein wichtiger Partner bei der Entdeckung von Arzneimitteln sind!
Referenz:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [j]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P., Obach R. S, et al. Eine neuartige Relaismethode zur Bestimmung niedriger - Clearance -Werte [j]. Arzneimittelstoffwechsel und Disposition, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Postzeit: 2024 - 07 - 19 17:20:41