Ĉar la drogaj metaboligaj enzimaj agadoj iom post iom malpliiĝas kun la plilongigo de in vitro -inkuba tempo, tradiciaj in vitro -metabolaj modeloj havas limojn kiel mallonga inkuba tempo, malalta metabola konvertiĝo kaj alta pli malalta limo de detekto (la kvanta malsupra limo de CLINT -provo estas 2.5 μL /(MIN · 106 -ĉeloj), kiu CAN ne estas antaŭdirebla de CLIND).[1]. Dume,Hepatocitos havas pli da enzimoj bezonataj por oksidado, redukto, hidrolizo kaj dimerigaj reagoj kompare kunhepataj mikrosomoj, kaj en in vitro -sistemoj, multaj novaj modeloj tendencas esti optimumigitaj surbaze de laHepatocito sistemo kaj plu imitas la en vivo medion por plilongigi la retenadon de enzima agado enHepatocitos, kaj la plilongigo de la inkuba tempo provizas la eblecon monitori sufiĉan metabolan transformon de malrapidaj metaboligaj drogoj[1,2].
Konsiderante ĉi tion, Iphase, kiel gvidanto en biologiaj reagentoj por esplorado en vitro, pioniris la sistemon de Hepatomax ™ kaj HepatOcon ™ -amaskomunikilaro surbazeHepatocitoS kiel ekzemplo, kaj ambaŭ sistemoj estis starigitaj por la determino de la agado kaj metabola stabileco de specifaj enzimaj tipoj kaj la pliigo de responda valoro de metabolitoj de la drogo -tolbutamido je 10 tagoj kaj 7 tagoj por kontroli la sistemojn. Metabolita Pliigi Respondan Valoron je 10 tagoj kaj aktiveco kaj metabola stabileco de specifaj enzimaj tipoj ĉe 7 tagoj estis determinitaj por validigi la sistemojn.
- (1) La du sistemaj procezoj pri validumado de drogoj estas kiel sekvas:
IPHASE - Hepatomax ™estas ko -kultura sistemo de frostigitaj muroj primaraj homaj hepatocitoj kaj stromaj ĉeloj. Primaraj homaj hepatocitoj estis reanimigitaj kaj inkubitaj kun stromaj ĉeloj en Hepatop ™ meza dum 3 tagoj por komenci la teston pri administrado de drogoj, kaj la metabolo de la drogo efektiviĝis en serumo - libera hepatodo ™, kiu estis replenigita nur kun la drogo sen ŝanĝi la mediumon. Entute 4, 72, 168 kaj 240 horojn post administrado de drogoj, la valoro aldonita de drogaj metabolitoj estis determinita por analizo.
IPHASE - HepatoCon ™, aliflanke, estas sistemo por kultado de frostigitaj adeptaj primaraj homaj hepatocitoj en HepatOcon ™ mediumo. Post revivigado de la primara homoHepatocitoS, la testo pri administrado de drogoj estis farita post 3 tagoj da kulturo en HepatOcon ™ meza, kaj la posta tempo de administrado, la kultur -sistemo kaj la prova metodaro estis la samaj kiel tiuj de la sistemo Hepatomax ™.
Dume, por certigi la precizecon kaj rigorecon de la rezultoj, Iphase plenumis mezan kontrolon (ĉelo - libera) kaj stroman ĉelan kontrolon samtempe, kun tri replikoj, kaj la rezultoj montris, ke laIPHASE - Hepatomax ™ KajIPHASE - HepatoCon ™ Sistemoj produktis fortan pintan metabolan respondon de la tago 3 pluen, kaj ke ili ambaŭ montris fortan metabolan turniĝan indicon.
- (2) Droga metabolo dependas ĉefe de la hepatocitoCYP450Enzima sistemo, kaj ĝia agado povas esti mezurita por pli bone ekzameni.
LaIPHASE - Hepatomax ™ KajIPHASE - HepatoCon ™ Sistemoj havas bonan aplikeblecon.
IPHASE starigis kvar kategoriojn de meza kontrolo (neniuj ĉeloj), Hepatomax ™, HepatOcon ™ kaj stromaj ĉeloj. Uzante muron - adepta primara homoHepatocitos kiel ekzemplo, la metabolito pliigas valorojn deCYP1A2, CYP2B6KajCYP3A4estis kontrolitaj je la tago 0, 3 kaj 7 postHepatocitoReakiro dum 3 tagoj uzante finasteride, bupropion kaj midazolam kiel la substratojn respektive. Metabolaj kreskaj valoroj montris, ke ambaŭIPHASE - Hepatomax ™ KajIPHASE - HepatoCon ™ Sistemoj montris aktivan enziman agadon antaŭ la tago 7, konstante antaŭenigante normalan drogan metabolon.
- (3) Krom la validigo de enzima agado, bona metabola stabileco ankaŭ estas grava kaj nemalhavebla paŝo por validigi la utilecon de in vitro -modeloj.
IPHase starigis tri kategoriojn de Hepatomax ™, HepatOcon ™ kaj Stromal -ĉeloj por determini la metabolan stabilecon de tolbutimido dum periodo de 80 horoj uzante adeptajn primarajn homajn hepatocitojn kiel ekzemplon, kiuj estis administritaj 3 tagojn post reanimado de primaraHepatocitos, kaj la rezultoj montris, ke ambaŭIPHASE - Hepatomax ™ KajIPHASE - HepatoCon ™ Sistemoj ambaŭ montris fortikan metabolan malplenigan agadon ene de la plej longa valoro de la provotempo.
Resume, Iphase, kiel gvidanto en in vitro bio - reagiloj, disvolviĝisIPHase Hepatomax ™ KajIPHase HepatOcon ™ In vitro -modeloj bazitaj sur muro - Aplikita Primara Homo, Simio, Kanino, Rato kaj MusoHepatocitoS kaj stromaj ĉeloj de diversaj genroj, kun bonega metabola turno, aktivaj enzimaj agadoj kaj potencaj metabolaj malplenigaj agadoj, kiuj ofertas novajn elektojn por niaj klientoj por disvolvi malaltajn - malplenigajn drogojn, kaj estas nemalhavebla partnero por realigi malkovron de drogoj! LaIPHase Hepatomax ™ KajIPHase HepatOcon ™ In vitro -modeloj ofertas bonegajn metabolajn turnajn tarifojn, aktivajn enzimajn agadojn kaj fortajn metabolajn malplenigajn agadojn, provizante novajn eblojn al klientoj por disvolvi malaltajn - malplenigajn drogojn, kaj estas grava partnero en malkovro de drogoj!
Referenco:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Nova relaja metodo por determini malaltajn - malplenigajn valorojn [J]. Drug -metabolo kaj dispozicio, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Afiŝotempo: 2024 - 07 - 19 17:20:41