Dado que las actividades enzimáticas de metabolización del fármaco disminuyen gradualmente con la prolongación del tiempo de incubación in vitro, los modelos tradicionales de metabolismo in vitro tienen limitaciones, como un tiempo de incubación corto, una baja conversión metabólica y un alto límite inferior de detección (el límite inferior cuantitativo del ensayo Clint es 2.5 μl /(mínimo · 106 células)), que no se puede predicciones cuantitativas de CLINT de metas de metas lentas lentamente.[1]. Mientras tanto,hepatocitoS tienen más enzimas necesarias para la oxidación, reducción, hidrólisis y reacciones de dimerización en comparación conmicrosomas de hígado, y en sistemas in vitro, muchos modelos novedosos tienden a optimizarse según elhepatocito sistema e imitar aún más el entorno in vivo para prolongar la retención de la actividad enzimática enhepatocitoS, y la prolongación del tiempo de incubación proporciona la posibilidad de monitorear la transformación metabólica suficiente de las drogas metabolizantes lentas[1,2].
En vista de esto, la iPhase, como líder en reactivos biológicos para la investigación in vitro, ha sido pionera en el sistema Hepatomax ™ y el sistema de medios Hepatocon ™ basado en el estudio de los hepatocitos primarios adherentes y las células estromales de varios géneros, incluidos los medios de comunicación humanos, caninos, ratas y ratones, etc., los medios de medios HEPATOMAX ™ se desarrollaron los medios de medio de los medios de medios HEPATOMAX ™.hepatocitoS como ejemplo, y ambos sistemas se establecieron para la determinación de la actividad y la estabilidad metabólica de tipos de enzimas específicos y el aumento en el valor de respuesta de los metabolitos de la tolbutamida del fármaco a los 10 días y 7 días para verificar los sistemas. El valor de respuesta de aumento de metabolitos a los 10 días y la actividad y la estabilidad metabólica de tipos de enzimas específicos a los 7 días se determinó para validar los sistemas.
- (1) Los dos procesos sistemáticos de cultivo de validación de fármacos son los siguientes:
IPhase - Hepatomax ™es un sistema de cultivo de hepatocitos humanos primarios paredes congeladas y células estromales. Los hepatocitos humanos primarios se reanudaron y se incubaron con células estromales en el medio Hepatop ™ durante 3 días para comenzar el ensayo de administración del fármaco, y el metabolismo del medicamento se llevó a cabo en el medio sérico - Hepatodo ™ libre, que se reemplazó solo con el medicamento sin cambiar el medio. Un total de 4, 72, 168 y 240 horas después de la administración de drogas, se determinó el valor agregado de metabolitos de drogas para el análisis.
IPhase - Hepatocon ™, por otro lado, es un sistema para cultivar hepatocitos humanos primarios adherentes congelados en medio Hepatocon ™. Después de resucitar al humano primariohepatocitoS, el ensayo de la Administración de Medicamentos se realizó después de 3 días de cultivo en el medio Hepatocon ™ solo, y el tiempo posterior de administración, el sistema de cultivo y la metodología del ensayo fueron los mismos que los del sistema Hepatomax ™.
Mientras tanto, para garantizar la precisión y el rigor de los resultados, la iPhase realizó un control medio (celda - libre) y un control de células estromal al mismo tiempo, con tres repeticiones, y los resultados mostraron que elIPhase - Hepatomax ™ yIPhase - Hepatocon ™ Los sistemas produjeron una fuerte respuesta de metabolito máximo desde el día 3 en adelante, y que ambos mostraron una fuerte tasa de rotación metabólica.
- (2) El metabolismo de las drogas depende principalmente del hepatocitoCYP450Sistema enzimático, y su actividad puede medirse para examinar mejor.
ElIPhase - Hepatomax ™ yIPhase - Hepatocon ™ Los sistemas tienen buena aplicabilidad.
La iPhase Configura cuatro categorías de control medio (sin células), hepatomax ™, hepatocon ™ y células estromales. Uso de la pared - humano primario adherentehepatocitoS Como ejemplo, el metabolito aumenta los valores deCYP1A2, CYP2B6yCYP3A4fueron verificados en el día 0, 3 y 7 despuéshepatocitoRecuperación durante 3 días utilizando finasterida, bupropion y midazolam como sustratos, respectivamente. Los valores de aumento del metabolito mostraron que ambosIPhase - Hepatomax ™ yIPhase - Hepatocon ™ Los sistemas mostraron actividad enzimática activa para el día 7, promoviendo constantemente el metabolismo normal de los medicamentos.
- (3) Además de la validación de la actividad enzimática, la buena estabilidad metabólica también es un paso importante e indispensable para validar la utilidad de los modelos in vitro.
La iPhase estableció tres categorías de células Hepatomax ™, Hepatocon ™ y Stromal para determinar la estabilidad metabólica de la tolbutimida durante un período de 80 horas usando hepatocitos humanos primarios adherentes como ejemplo, que se administraron 3 días después de la reanimación de la reanimación primaria dehepatocitos, y los resultados mostraron que ambosIPhase - Hepatomax ™ yIPhase - Hepatocon ™ Ambos sistemas mostraron una actividad de eliminación metabólica robusta dentro del valor más largo del tiempo de ensayo.
En resumen, iPhase, como líder en biotroes in vitro, se ha desarrolladoIPhase hepatomax ™ yIPhase Hepatocon ™ Modelos in vitro basados en la pared - Aplicada primaria humana, mono, canina, rata y ratónhepatocitoS y células estromales de varios géneros, con excelente facturación metabólica, actividades enzimáticas activas y poderosas actividades de aclaramiento metabólico, que ofrecen nuevas opciones para que nuestros clientes desarrollen drogas de baja - autorización, ¡y son un socio indispensable para realizar un descubrimiento de fármacos! ElIPhase hepatomax ™ yIPhase Hepatocon ™ Los modelos in vitro ofrecen excelentes tasas de rotación metabólica, actividades enzimáticas activas y fuertes actividades de autorización metabólica, proporcionando nuevas opciones para que los clientes desarrollen bajos drogas de autorización, ¡y son un socio importante en el descubrimiento de medicamentos!
Referencia:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Un nuevo método de retransmisión para determinar los valores bajos de la eliminación [j]. Metabolismo y disposición de drogas, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Tiempo de publicación: 2024 - 07 - 19 17:20:41