Koska lääkkeiden metaboloivien entsyymivaikutusten vähenemisen vähitellen in vitro -inkubaatioajan pidentämisen myötä perinteisillä in vitro -metabolismimalleilla on rajoituksia, kuten lyhyt inkubaatioaika, matala metabolinen muuntaminen ja korkea havaitsemisen alaraja (kvantitatiivinen alaraja Clint -määritys on 2,5 μl /(min · 106 -solu), jotka eivät pysty tarkasti ennustamaan hitaasti metabolisolua.[1]. Sillä välin,hepatosyyttiS: llä on enemmän entsyymejä hapettumiseen, pelkistämiseen, hydrolyysiin ja dimerointireaktioihin verrattunamaksan mikrosomitja in vitro -järjestelmissä monet uudet mallit ovat yleensä optimoitujahepatosyytti Järjestelmä ja jäljittele edelleen in vivo -ympäristöä entsyymiaktiivisuuden pidättämisen pidentämiseksihepatosyyttiS, ja inkubaatioajan pidentyminen tarjoaa mahdollisuuden seurata hitaiden metabolisoivien lääkkeiden riittäviä metabolisia muutoksia[1,2].
Tämän vuoksi Iphaasi on in vitro -tutkimuksen biologisten reagenssien johtajana hepatomax ™ -järjestelmän ja hepatocon ™ -väliainejärjestelmän perusteella, joka perustuu tarttuvien primaaristen hepatosyyttien ja erilaisten sukujen stromasolujen tutkimukseen, mukaan lukien ihmisen, apinan, koiran, ratin ja hiiren, jne. Kehitettävien ADHERENAX ™ -systeemien ja hepatocon -järjestelmien avulla.hepatosyyttiS esimerkki, ja molemmat järjestelmät perustettiin spesifisten entsyymityyppien aktiivisuuden ja metabolisen stabiilisuuden määrittämiseksi sekä lääkkeen tolbutamidin metaboliittien vasteen arvon lisääntymisessä 10 päivässä ja 7 päivässä järjestelmien varmentamiseksi. Metaboliitin lisääminen vasteen arvo 10 päivässä ja spesifisten entsyymityyppien aktiivisuus ja metabolinen stabiilisuus 7 päivässä määritettiin järjestelmien validoimiseksi.
- (1) Kaksi systemaattista lääkkeen validointiviljelyprosessia ovat seuraavat:
Iphaasi - Hepatomax ™on CO - -viljelyjärjestelmä jäädytettyjen seinämien primaaristen ihmisen hepatosyyttien ja stroomasolujen kanssa. Ihmisen primaariset maksasolut elvytettiin ja inkuboitiin stroomasolujen kanssa Hepatop ™ -väliaineessa 3 päivän ajan lääkkeen antamismäärityksen aloittamiseksi, ja lääkkeen aineenvaihdunta suoritettiin seerumissa - Free Hepatodo ™ -väliaine, joka täydennettiin vain lääkkeellä vaihtamatta väliainetta. Kaikkiaan 4, 72, 168 ja 240 tuntia lääkkeen antamisen jälkeen lääkeaineiden metaboliittien lisäarvo määritettiin analyysiä varten.
Iphase - Hepatocon ™Toisaalta on järjestelmä jäädytettyjen kiinnittymien ihmisen hepatosyyttien viljelyyn Hepatocon ™ -väliaineessa. Ensisijaisen ihmisen elvyttämisen jälkeenhepatosyyttiS, lääkehallinnon määritys suoritettiin 3 päivän viljelyn jälkeen pelkästään Hepatocon ™ -väliaineessa, ja myöhempi antamisaika, viljelyjärjestelmä ja määritysmenetelmä olivat samat kuin Hepatomax ™ -järjestelmän.
Samaan aikaan tulosten tarkkuuden ja tiukkaan varmistamiseksi Iphaasi suoritti keskimääräisen kontrollin (solu - vapaa) ja stroomasolujen hallinta samanaikaisesti kolmella toistolla, ja tulokset osoittivat, ettäIphaasi - Hepatomax ™ jaIphase - Hepatocon ™ Järjestelmät tuottivat voimakkaan piikin metaboliittivasteen päivästä 3 alkaen ja että ne molemmat osoittivat voimakasta metabolista vaihtuvuutta.
- (2) Lääkkeen aineenvaihdunta riippuu pääasiassa hepatosyytistäCYP450Entsyymijärjestelmä ja sen aktiivisuus voidaan mitata paremmin tutkimiseksi.
SeIphaasi - Hepatomax ™ jaIphase - Hepatocon ™ Järjestelmillä on hyvä sovellettavuus.
Iphaasi asetti neljä keskipitkän ohjauksen luokkaa (ei soluja), Hepatomax ™, Hepatocon ™ ja stroomasolut. Käyttämällä seinää - Tarttuva primaarinen ihminenhepatosyyttiS esimerkiksi metaboliitin lisäävät arvojaCYP1A2, CYP2B6jaCYP3A4vahvistettiin päivänä 0, 3 ja 7 jälkeenhepatosyyttiPalautus 3 päivän ajan finasteridilla, bupropionilla ja midatsolaamilla substraattina. Metaboliitin lisäysarvot osoittivat, että molemmatIphaasi - Hepatomax ™ jaIphase - Hepatocon ™ Järjestelmät osoittivat aktiivista entsyymiaktiivisuutta päivään 7 mennessä, mikä edisti jatkuvasti normaalia lääkkeen aineenvaihduntaa.
- (3) Entsyymiaktiivisuuden validoinnin lisäksi hyvä metabolinen stabiilisuus on myös tärkeä ja välttämätön vaihe in vitro -mallien hyödyllisyyden validoinnissa.
Iphaasi perustaa kolme hepatomax ™-, hepatocon ™- ja stroomasolujen luokkaa tolbutimidin metabolisen stabiilisuuden määrittämiseksi 80 tunnin ajanjaksolla käyttämällä tarttuvia primaarisia ihmisen hepatosyyttejä, joita annettiin 3 päivää primaarisen elvyttämisen jälkeenhepatosyyttiS, ja tulokset osoittivat, että molemmatIphaasi - Hepatomax ™ jaIphase - Hepatocon ™ Molemmat järjestelmät osoittivat voimakasta aineenvaihdunnan puhdistuma -aktiivisuutta määritysajan pisin arvo.
Yhteenvetona voidaan todetaIphase Hepatomax ™ jaIphase Hepatocon ™ In vitro -mallit, jotka perustuvat seinäänhepatosyyttiS- ja stroomasolut, joilla on erinomainen metabolinen liikevaihto, aktiiviset entsyymitoiminnot ja tehokkaat aineenvaihduntatoimet, jotka tarjoavat asiakkaillemme uusia valintoja kehittää matala - SeIphase Hepatomax ™ jaIphase Hepatocon ™ In vitro -mallit tarjoavat erinomaisen aineenvaihdunnan liikevaihtoasteen, aktiivisen entsyymitoiminnan ja vahvan aineenvaihdunnan selvitystoimet, jotka tarjoavat asiakkaille uusia vaihtoehtoja alhaisten - puhdistuslääkkeiden kehittämiseksi ja ovat tärkeä kumppani huumeiden löytämisessä!
Viite:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et ai. Uusi relemenetelmä alhaisen - puhdistusarvojen määrittämiseksi [J]. Lääkkeen aineenvaihdunta ja dispositio, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Viestin aika: 2024 - 07 - 19 17:20:41