Étant donné que les activités enzymatiques métabolisantes du médicament diminuent progressivement avec la prolongation du temps d'incubation in vitro, les modèles traditionnels de métabolisme in vitro ont des limites telles que la limite d'incubation courte, la faible conversion métabolique et la limite de détection quantitative inférieure de CLINT sont de 2,5 μL / (min · 106 cellules))[1]. Entre-temps,hépatocytes ont plus d'enzymes nécessaires pour les réactions d'oxydation, de réduction, d'hydrolyse et de dimérisation par rapport àmicrosomes hépatiques, et dans les systèmes in vitro, de nombreux nouveaux modèles ont tendance à être optimisés en fonction de lahépatocyte système et imitez en outre l'environnement in vivo pour prolonger la rétention de l'activité enzymatique enhépatocyteS, et la prolongation du temps d'incubation offre la possibilité de surveiller une transformation métabolique suffisante des médicaments à métabolisation lente[1,2].
Compte tenu de cela, l'iPhase, en tant que leader des réactifs biologiques pour la recherche in vitro, a été le pionnier du système médiatique Hepatomax ™ et de Hepatocon ™ basé sur l'étude des hépatocytes primaires adhérents et des cellules stromales de divers genres, y compris l'homme, le singe, le canine, le rat et la souris, etc. Le système de médias HepatoMax ™ a été développé par le système d'atomax ™ humainhépatocytes comme exemple, et les deux systèmes ont été mis en place pour la détermination de l'activité et la stabilité métabolique des types d'enzymes spécifiques et l'augmentation de la valeur de réponse des métabolites du tolbutamide médicamenteuse à 10 jours et 7 jours pour vérifier les systèmes. La valeur de la réponse à l'augmentation du métabolite à 10 jours et l'activité et la stabilité métabolique de types d'enzymes spécifiques à 7 jours ont été déterminées pour valider les systèmes.
- (1) Les deux processus systématiques de culture de validation des médicaments sont les suivants:
Iphase - hepatomax ™est un système de culture co - hépatocytes humains primaires paroi congelés et cellules stromales. Les hépatocytes humains primaires ont été réanimés et incubés avec des cellules stromales dans le milieu Hepatop ™ pendant 3 jours pour démarrer le test de l'administration du médicament, et le métabolisme du médicament a été effectué dans le milieu de l'hépatodo ™ libre - Au total, 4, 72, 168 et 240 heures après l'administration du médicament, la valeur ajoutée des métabolites médicamenteuse a été déterminée pour l'analyse.
Iphase - hepatocon ™, en revanche, est un système pour cultiver des hépatocytes humains primaires adhérents congelés dans le milieu Hepatocon ™. Après avoir ressuscité l'humain primairehépatocyteS, le test de l'administration du médicament a été effectué après 3 jours de culture dans le milieu Hepatocon ™ seul, et le moment suivant de l'administration, le système de culture et la méthodologie des tests étaient les mêmes que ceux du système Hepatomax ™.
Entre-temps, pour assurer la précision et la rigueur des résultats, iphase a effectué un contrôle moyen (cellule - libre) et un contrôle des cellules stromales en même temps, avec trois réplications, et les résultats ont montré que leIphase - hepatomax ™ etIphase - hepatocon ™ Les systèmes ont produit une forte réponse de métabolite maximale à partir du jour 3, et qu'ils ont tous deux montré un taux de renouvellement métabolique fort.
- (2) le métabolisme des médicaments dépend principalement de l'hépatocyteCYP450Le système enzymatique et son activité peuvent être mesurés pour mieux examiner.
LeIphase - hepatomax ™ etIphase - hepatocon ™ Les systèmes ont une bonne applicabilité.
Iphase a mis en place quatre catégories de contrôle moyen (pas de cellules), Hepatomax ™, Hepatocon ™ et cellules stromales. Utilisation du mur - Adhérent Primaire humainhépatocytes comme exemple, le métabolite augmente les valeurs deCYP1A2, CYP2B6etCYP3A4ont été vérifiés au jour 0, 3 et 7 aprèshépatocyteRécupération pendant 3 jours en utilisant le finastéride, le bupropion et le midazolam comme substrats, respectivement. Les valeurs d'augmentation des métabolites ont montré que les deuxIphase - hepatomax ™ etIphase - hepatocon ™ Les systèmes ont montré une activité enzymatique active au jour 7, favorisant systématiquement le métabolisme normal des médicaments.
- (3) En plus de la validation de l'activité enzymatique, une bonne stabilité métabolique est également une étape importante et indispensable pour valider l'utilité des modèles in vitro.
Iphase a mis en place trois catégories de cellules Hepatomax ™, Hepatocon ™ et Stromal pour déterminer la stabilité métabolique du tolbutimide sur une période de 80 heures en utilisant des hépatocytes humains primaires adhérents comme exemple, qui ont été administrés 3 jours après la réanimation de primairehépatocyteS, et les résultats ont montré que les deuxIphase - hepatomax ™ etIphase - hepatocon ™ Les systèmes ont tous deux montré une activité de dégagement métabolique robuste dans la valeur la plus longue du temps de test.
En résumé, iPhase, en tant que leader de In vitro Bio - réactifs, a développéIphase hepatomax ™ etIphase hepatocon ™ Modèles in vitro basés sur le mur - Applied Primary Human, singe, canine, rat et sourishépatocyteS et cellules stromales de divers genres, avec un excellent renouvellement métabolique, des activités enzymatiques actives et de puissantes activités de dégagement métabolique, qui offrent à nos clients de nouveaux choix pour développer des médicaments à faible autorisation, et sont un partenaire indispensable pour réaliser la découverte de médicaments! LeIphase hepatomax ™ etIphase hepatocon ™ Les modèles in vitro offrent d'excellents taux de roulement métabolique, des activités enzymatiques actives et de fortes activités de dédouanement métaboliques, offrant aux clients de nouvelles options pour développer des médicaments à faible autorisation et sont un partenaire important dans la découverte de médicaments!
Référence:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Une nouvelle méthode de relais pour déterminer les valeurs de dégagement faibles [J]. Métabolisme et disposition des médicaments, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Heure du poste: 2024 - 07 - 19 17:20:41