O modelo de metabolismo de hepatocitos in vitro facilita os estudos farmacocinéticos de metabolización de metabolización

Dado que as actividades de encima metabolizadoras de drogas diminúen gradualmente coa prolongación do tempo de incubación in vitro, os modelos tradicionais de metabolismo in vitro teñen limitacións como un curto tempo de incubación, baixa conversión metabólica e un alto límite inferior de detección (o límite inferior cuantitativo do ensayo de clint é de 2,5 μl /(min.^[1]. Mentres tanto,hepatocitoS teñen máis enzimas necesarias para as reaccións de oxidación, redución, hidrólise e dimerización en comparación conMicrosomas hepáticos, e en sistemas in vitro, moitos modelos novos tenden a optimizarse en función dohepatocito sistema e imita aínda máis o ambiente in vivo para prolongar a retención da actividade da encimahepatocitoS, e a prolongación do tempo de incubación proporciona a posibilidade de controlar a transformación metabólica suficiente de medicamentos metabolizadores lentos^[1,2].

Á vista disto, a IPHase, como líder en reactivos biolóxicos para a investigación in vitro, foi pioneira no sistema Hepatomax ™ e no sistema de medios Hepatocon ™ baseado no estudo de hepatocitos primarios adherentes e células estromais de varios xéneros, incluído o sistema humano, canino, rato e rato, etc.hepatocitoS como exemplo, e ambos sistemas creáronse para a determinación da actividade e a estabilidade metabólica de tipos específicos de encimas e o aumento do valor de resposta dos metabolitos da tolbutamida do medicamento aos 10 días e 7 días para verificar os sistemas. O valor da resposta de aumento do metabolito aos 10 días e a actividade e a estabilidade metabólica de tipos de enzimas específicas aos 7 días determináronse para validar os sistemas.

• (1) Os dous procesos sistemáticos de cultura de validación de drogas son os seguintes:

  Iphase - Hepatomax ™é un sistema de cultivo de hepatocitos humanos primarios con amuralla conxelada e células estromais. Os hepatocitos humanos primarios foron reanimados e incubados con células estromais no medio HepAtop ™ durante 3 días para iniciar o ensaio da Administración de drogas, e o metabolismo do medicamento levouse a cabo en medio de soro - Libre Hepatodo ™, que só se reabasteceu co medicamento sen cambiar o medio. Para a súa análise determinouse un total de 4, 72, 168 e 240 horas despois da administración de drogas, o valor engadido de metabolitos de drogas.

 

  IPHase - Hepatocon ™, por outra banda, é un sistema para cultivar hepatocitos humanos primarios adheridos conxelados no medio Hepatocon ™. Despois de reanimar o humano primariohepatocitoS, o ensaio da Administración de drogas realizouse despois de 3 días de cultura só no medio Hepatocon ™, e o tempo posterior de administración, o sistema de cultura e a metodoloxía de ensaio foron os mesmos que os do sistema Hepatomax ™.

 

Mentres tanto, para garantir a precisión e o rigor dos resultados, a IPHase realizou un control medio (célula - libre) e un control de células estromais ao mesmo tempo, con tres replicacións e os resultados demostraron que oIphase - Hepatomax ™ eIPHase - Hepatocon ™ Os sistemas produciron unha forte resposta de metabolito máximo a partir do día 3 en diante e que ambos mostraron unha forte taxa de rotación metabólica.

 

 

• (2) O metabolismo das drogas depende principalmente do hepatocitoCYP450O sistema de enzimas e a súa actividade pódense medir para examinar mellor.

OIphase - Hepatomax ™ eIPHase - Hepatocon ™ Os sistemas teñen boa aplicabilidade.

IPHase configurou catro categorías de control medio (sen células), Hepatomax ™, Hepatocon ™ e células estromais. Usando parede - Humano primario adherentehepatocitos como exemplo, o metabolito aumenta os valores deCYP1A2, CYP2B6eCYP3A4verificáronse no día 0, 3 e 7 despoishepatocitoRecuperación durante 3 días usando finasteride, bupropion e midazolam como substratos, respectivamente. Os valores de aumento de metabolitos demostraron que os dousIphase - Hepatomax ™ eIPHase - Hepatocon ™ Os sistemas mostraron a actividade da encima activa para o día 7, promovendo constantemente o metabolismo normal dos fármacos.

 

• (3) Ademais da validación da actividade enzimática, a boa estabilidade metabólica tamén é un paso importante e indispensable para validar a utilidade de modelos in vitro.

IPHase creou tres categorías de células Hepatomax ™, Hepatocon ™ e estromal para determinar a estabilidade metabólica da tolbutimida durante un período de 80 horas usando hepatocitos humanos primarios adherentes como exemplo, que se administraron 3 días despois da reanimación de primariahepatocitos, e os resultados demostraron que tanto oIphase - Hepatomax ™ eIPHase - Hepatocon ™ Ambos os sistemas mostraron unha robusta actividade de depuración metabólica dentro do valor máis longo do tempo de ensaio.

 

En resumo, IPHase, como líder en bio bio - reactivos, desenvolveuseIPHase Hepatomax ™ eIPHase Hepatocon ™ Modelos in vitro baseados na parede - Primaria aplicada humana, mono, canina, rata e ratohepatocitoS e células estromais de varios xéneros, cunha excelente rotación metabólica, actividades enzimáticas activas e poderosas actividades metabólicas, que ofrecen novas opcións para que os nosos clientes poidan desenvolver drogas de baixa - OIPHase Hepatomax ™ eIPHase Hepatocon ™ Os modelos in vitro ofrecen excelentes taxas de rotación metabólica, actividades enzimáticas activas e fortes actividades metabólicas, proporcionando novas opcións para que os clientes poidan desenvolver drogas de baixa - e son un importante socio no descubrimento de drogas.

 

Referencia:

[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.

[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Un novo método de relevo para determinar os valores de depuración baixa [J]. Metabolismo e disposición de drogas, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.