Mivel a gyógyszer -metabolizáló enzimaktivitások fokozatosan csökkennek az in vitro inkubációs idő meghosszabbításával, a hagyományos in vitro metabolizmus modellek olyan korlátozásokkal rendelkeznek, mint például a rövid inkubációs idő, az alacsony anyagcsere -átalakulás és a magas alsó határérték (a Clint Assay kvantitatív alsó határértéke 2,5 μL /(min · 106 sejt)), amely nem tudja pontosan megjósolni a lassan metabolizált gyógyszerkészítmény billentyűletét.[1]- Közben,májsávs több enzim szükséges az oxidációhoz, a redukcióhoz, a hidrolízishez és a dimerizációs reakciókhozmájmikroszómák, és in vitro rendszerekben sok új modellt általában amájsáv rendszer, és tovább utánozza az in vivo környezetet, hogy meghosszabbítsa az enzimaktivitás megtartásátmájsávS, és az inkubációs idő meghosszabbítása lehetőséget biztosít a lassú metabolizáló gyógyszerek megfelelő metabolikus átalakulásának monitorozására[1,2].
Ennek fényében az Iphase, mint az in vitro kutatás biológiai reagenseinek vezetője, úttörője volt a Hepatomax ™ rendszernek és a Hepatocon ™ médiarendszernek a tapadó primer hepatocyták és a különféle nemzetségek stroma sejtjeinek vizsgálatán alapuló vizsgálaton alapuló, a humán, majom -media -rendszert, valamint az adher -™ rendszert, valamint a hepatocon -it.májsávS példaként, és mindkét rendszert felállították a specifikus enzimtípusok aktivitásának és metabolikus stabilitásának meghatározására, valamint a gyógyszer -tolbutamid metabolitjainak válaszértékének növekedésére 10 napon és 7 napon a rendszerek ellenőrzéséhez. A metabolit növekedési értéke 10 napon, és a specifikus enzimtípusok aktivitását és metabolikus stabilitását 7 napos állapotban határozták meg a rendszerek validálására.
- (1) A két szisztematikus gyógyszer -validációs tenyésztési folyamat a következők:
Iphase - hepatomax ™egy Co - A fagyasztott fallal körülvett primer humán májsejtek és stroma sejtek tenyésztési rendszere. Az elsődleges humán májsejteket újraélesztették és stroma sejtekkel inkubáltuk hepatop ™ táptalajban 3 napig a gyógyszer -beadási vizsgálat megkezdéséhez, és a gyógyszer metabolizmusát szérum - Free Hepatodo ™ táptalajban hajtottuk végre, amelyet csak a gyógyszerrel töltöttek be, anélkül, hogy a tápközeg megváltoztatása lenne. Összesen 4, 72, 168 és 240 órával a gyógyszer -beadás után a gyógyszer -metabolitok hozzáadott értékét meghatározták az elemzéshez.
Iphase - hepatocon ™Másrészt a fagyasztott tapadó primer humán májsejtek tenyésztésének rendszere a hepatocon ™ tápközegben. Az elsődleges ember újraélesztése utánmájsávS, a gyógyszer -beadási vizsgálatot 3 napos tenyésztés után végeztük a hepatocon ™ közepes közepén, és az azt követő beadási idő, a tenyésztési rendszer és a vizsgálati módszer megegyezett a Hepatomax ™ rendszerévé.
Eközben az eredmények pontosságának és szigorának biztosítása érdekében az Iphase közepes kontrollt (Cell - Free) és egy stroma sejtvezérlést hajtott végre, három replikációval, és az eredmények azt mutatták, hogy az eredmények azt mutatták, hogy aIphase - hepatomax ™ ésIphase - hepatocon ™ A rendszerek a 3. naptól kezdve erős parkolit választ hozott létre, és mindkettő erős anyagcsere -forgalmat mutattak.
- (2) A gyógyszer -anyagcsere elsősorban a májsejtektől függCYP450Az enzimrendszer és aktivitása mérhető a jobb vizsgálat érdekében.
AIphase - hepatomax ™ ésIphase - hepatocon ™ A rendszerek jó alkalmazhatósággal rendelkeznek.
Az iphase négy kategóriát állított fel a közepes kontroll (nem cellák), a hepatomax ™, a hepatocon ™ és a stromal sejtekből. Fal használata - tapadó primer embermájsávs példaként a metabolit növeli aCYP1A2, CYP2B6ésCYP3A4ellenőrizték a 0., 3. és 7. naponmájsáv3 napig történő gyógyulás a finasterid, a bupropion és a midazolam felhasználásával, mint szubsztrátok. A metabolit növekedési értékei azt mutatták, hogy mindkettőIphase - hepatomax ™ ésIphase - hepatocon ™ A rendszerek aktív enzimaktivitást mutattak a 7. napra, következetesen elősegítve a normál gyógyszer -anyagcserét.
- (3) Az enzimaktivitás validálásán kívül a jó anyagcsere -stabilitás fontos és nélkülözhetetlen lépés az in vitro modellek hasznosságának validálásában is.
Az iphase a Hepatomax ™, a Hepatocon ™ és a Stromal sejtek három kategóriáját állította be a tolbutimid metabolikus stabilitásának meghatározására 80 órás időtartamon keresztül, ragaszkodó primer humán májsejtek felhasználásával.májsávs, és az eredmények azt mutatták, hogy mindkettő aIphase - hepatomax ™ ésIphase - hepatocon ™ A rendszerek mindkettő robusztus metabolikus clearance aktivitást mutattak a vizsgálati idő leghosszabb értékén belül.
Összefoglalva: az iphase, mint az in vitro bio - reagensek vezetője, kifejlesztettIphase hepatomax ™ ésIphase hepatocon ™ In vitro modellek falon alapulnak - alkalmazott primer ember, majom, kutya, patkány és egérmájsávS és a különféle nemzetségek stromális sejtjei, kiváló anyagcsere -forgalommal, aktív enzimaktivitással és erőteljes anyagcsere -elszámolási tevékenységekkel, amelyek új lehetőségeket kínálnak ügyfeleink számára az alacsony - clearance gyógyszerek kidolgozásához, és nélkülözhetetlen partner a kábítószer -felfedezés megvalósításához! AIphase hepatomax ™ ésIphase hepatocon ™ Az in vitro modellek kiváló anyagcsere -forgalmat, aktív enzimtevékenységeket és erős anyagcsere -elszámolási tevékenységeket kínálnak, új lehetőségeket kínálva az ügyfelek számára az alacsony - című gyógyszerek fejlesztésére, és fontos partner a kábítószer -felfedezésben!
Referencia:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [j]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Új relé módszer az alacsony - clearance értékek [j] meghatározására. Kábítószer -metabolizmus és diszpozíció, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
A postai idő: 2024 - 07 - 19 17:20:41