מודל חילוף החומרים הפטוציטים במבחנה חוץ גופית מקל על מחקרים פרמקוקינטיים איטיים - חילוף חומרים

מכיוון שפעילות האנזים של תרופות מטבוליזציה של אנזים יורדות בהדרגה עם התארכות זמן הדגירה החוץ -גופית, למודלים של חילוף חוץ חוץ -גופני מסורתי יש מגבלות כמו זמן דגירה קצר, המרה מטבולית נמוכה וגבול גילוי נמוך יותר של גילוי (הגבול הנמוך יותר של קלינט הוא 2.5 מיקרומטר /(דקה · 106 תאים)), אשר לא יכול לחזות מטביליות באטיות של Clint הוא 2.5 μl /min · 106 תאים)), ואינן יכולות להיות מטבוליות בהטיליות.^[1]ו בינתיים,הפטוציטל- S יש יותר אנזימים הנדרשים לתגובות חמצון, הפחתה, הידרוליזה ודימריזציה בהשוואהמיקרוזומי כבד, ובמערכות חוץ גופיות, מודלים חדשים רבים נוטים להיות מותאמים על בסיסהפטוציט מערכת ומחקים עוד יותר את הסביבה in vivo כדי להאריך את שמירת פעילות האנזים בהפטוציטS, והארכת זמן הדגירה מספקים אפשרות לפקח על טרנספורמציה מטבולית מספקת של תרופות חילוף חומרים איטיות^[1,2].

לאור זאת, iPhase, כמובילה במגנים ביולוגיים למחקר חוץ -גופני, החלוץ על מערכת ההפטומקס ™ ומערכת המדיה ™ הפטוקון המבוססת על המחקר של דביק ראשוני דבק ראשוני ותאים סטרומליים של המערכת האנושית, ומערכת המדיה של ה- Hepatoc,הפטוציטS כדוגמה, ושתי המערכות הוקמו לקביעת הפעילות והיציבות המטבולית של סוגי אנזים ספציפיים ולעלייה בערך התגובה של מטבוליטים של התרופה טולבוטמיד בעשרה ימים ו -7 ימים כדי לאמת את המערכות. מטבוליט מגדיל את ערך התגובה בעשרה ימים ופעילות ויציבות מטבולית של סוגי אנזים ספציפיים לאחר 7 ימים נקבעו לאמת את המערכות.

• (1) שני תהליכי תרבות אימות התרופות השיטתיים הם כדלקמן:

  Iphase - Hepatomax ™היא מערכת תרבות Co - תרבות של הפטוציטים אנושיים ראשוניים קפואים ותאי סטרומה. ההפטוציטים האנושיים הראשוניים הוחזרו והודרנו בתאי סטרומה במדיום ™ Hepatop במשך 3 ימים כדי להתחיל במבחן מתן התרופות, ומטבוליזם של התרופה בוצע במדיום סרום - הפטודו ™ חופשי, אשר הוחזר רק לתרופה מבלי לשנות את המדיום. בסך הכל נקבע 4, 72, 168 ו -240 שעות לאחר מתן התרופות, הערך המוסף של מטבוליטים לתרופות נקבע לניתוח.

 

  Iphase - Hepatocon ™לעומת זאת, היא מערכת לטיפוח הפטוציטים אנושיים ראשוניים קפואים במדיום ™ Hepatocon. לאחר החייאה של האדם הראשוניהפטוציטS, בדיקת ניהול התרופות בוצעה לאחר 3 ימי תרבות במדיום ™ Hepatocon בלבד, וזמן הניהול שלאחר מכן, מערכת התרבות ומתודולוגיית ה- Assay היו זהים לאלה של מערכת ™ Hepatomax.

 

בינתיים, כדי להבטיח את הדיוק והקפדנות של התוצאות, iPhase ביצעה בקרה בינונית (תא - חופשי) ובקרת תאים סטרומליים בו זמנית, עם שלוש שכפול והתוצאות הראו כי ה-Iphase - Hepatomax ™ וכןIphase - Hepatocon ™ מערכות הניבו תגובה מטבוליט שיא חזק מיום 3 ואילך, וכי שניהם הראו שיעור מחזור מטבולי חזק.

 

 

• (2) חילוף החומרים התרופתי תלוי בעיקר בהפטוציטCYP450מערכת האנזים, וניתן למדוד את פעילותה לבחינה טובה יותר.

THEIphase - Hepatomax ™ וכןIphase - Hepatocon ™ למערכות יש תחול טוב.

IPhase הגדיר ארבע קטגוריות של בקרה בינונית (ללא תאים), Hepatomax ™, Hepatocon ™ ותאי סטרומה. באמצעות קיר - אנוש ראשוני דבקהפטוציטכדוגמה, המטבוליט מגדיל את הערכים שלCYP1A2, CYP2B6וכןCYP3A4אומתו ביום 0, 3 ו -7 אחריהפטוציטהתאוששות במשך 3 ימים באמצעות Finasteride, Bupropion ו- Midazolam כמצעים, בהתאמה. ערכי הגדלת המטבוליטים הראו ששניהםIphase - Hepatomax ™ וכןIphase - Hepatocon ™ מערכות הראו פעילות אנזים פעילה ביום 7, וקידום בעקביות חילוף חומרים רגיל של תרופות.

 

• (3) בנוסף לאימות פעילות האנזים, יציבות מטבולית טובה היא גם צעד חשוב וחיוני באימות התועלת של דגמי חוץ גופית.

IPhase הגדיר שלוש קטגוריות של תאי Hepatomax ™, Hepatocon ™ ו- Stromal כדי לקבוע את היציבות המטבולית של טולבוטימיד במשך תקופה של 80 שעות באמצעות הפטוציטים אנושיים דבקים כדוגמה, אשר ניתנו 3 ימים לאחר החייאה ראשונית של ראשית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית ראשונית,הפטוציטS, והתוצאות הראו ששניהםIphase - Hepatomax ™ וכןIphase - Hepatocon ™ מערכות הראו שתיהן פעילות פינוי מטבולי חזק בערך הארוך ביותר של זמן הניתוח.

 

לסיכום, iphase, כמובילה בביו חוץ גופית - ריאגנטים, התפתחהIphase hepatomax ™ וכןIphase hepatocon ™ מודלים חוץ גופיים המבוססים על קיר - מיושם אנושי, קוף, כלב, עכברוש ועכברהפטוציטתאי S ו- Stromal מסוגים שונים, עם מחזור מטבולי מצוין, פעילויות אנזים פעילות ופעילויות פינוי מטבוליות עוצמתיות, המציעות אפשרויות חדשות ללקוחותינו לפתח תרופות נמוכות של אישור, והם שותף חיוני למימוש גילוי תרופות! THEIphase hepatomax ™ וכןIphase hepatocon ™ מודלים חוץ גופיים מציעים שיעורי תחלופה מטבולית מצוינים, פעילויות אנזים פעילות ופעילויות פינוי מטבוליות חזקות, ומספקות אפשרויות חדשות ללקוחות לפתח תרופות נמוכות של אישור, והם שותפים חשובים לגילוי תרופות!

 

הַפנָיָה:

[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [j]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.

[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. שיטת ממסר חדש לקביעת ערכי פינוי נמוכים [j]. חילוף החומרים והנטייה של התרופות, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.