Como as atividades da enzima metabolizante de medicamentos diminuem gradualmente com o prolongamento do tempo de incubação in vitro, os modelos tradicionais de metabolismo in vitro têm limitações como tempo de incubação curto, baixa conversão metabólica e alto limite inferior de detecção (o limite inferior do ensaio de clint é de 2,5 μl /(min · 106 células)), o que não pode ser atingido por flowl, que não pode ser atingido por 2,5 μl /(min de 106 células)), o que não pode ser o que não pode ser atingido, o que não pode ser atingido, o limite inferior do ensaio de clint é de 2,5 μl /(min de 106 células)), o que não pode ser o que não pode ser atingido, o que não pode ser atingido por um limite de clints.[1]. Enquanto isso,Hepatócitoss têm mais enzimas necessárias para oxidação, redução, hidrólise e reações de dimerização em comparação comMicrossomos hepáticose em sistemas in vitro, muitos modelos novos tendem a ser otimizados com base noHepatócitos sistema e imitar ainda o ambiente in vivo para prolongar a retenção da atividade enzimática emHepatócitoss e o prolongamento do tempo de incubação fornece a possibilidade de monitorar a transformação metabólica suficiente de medicamentos de metabolização lenta[1,2].
Em vista disso, a ifase, como líder em reagentes biológicos para pesquisa in vitro, foi pioneira no sistema Hepatomax ™ System e Hepatocon ™ Media, com base no estudo de hepatócitos primários e células hépates e mídias e mídias e mídias e o rato e o rato e o rato e o rato e o rato e o rato e o rato e o rato e o rato, etc. humanoHepatócitoss Como exemplo, e ambos os sistemas foram configurados para a determinação da atividade e a estabilidade metabólica de tipos de enzimas específicas e o aumento do valor de resposta dos metabólitos da tolbutamida do medicamento aos 10 dias e 7 dias para verificar os sistemas. Metabólito Aumente o valor da resposta em 10 dias e a atividade e a estabilidade metabólica de tipos de enzimas específicos em 7 dias foram determinados para validar os sistemas.
- (1) Os dois processos sistemáticos de cultura de validação de medicamentos são os seguintes:
Ifase - Hepatomax ™é um sistema de cultura co - Os hepatócitos humanos primários foram ressuscitados e incubados com células estromais no meio Hepatop ™ por 3 dias para iniciar o ensaio de administração de medicamentos, e o metabolismo do medicamento foi realizado no meio do soro - Free Hepatodo ™, que foi reabastecido apenas com o medicamento sem mudar o meio. Um total de 4, 72, 168 e 240 horas após a administração de medicamentos, o valor agregado dos metabólitos dos medicamentos foi determinado para análise.
Iphase - hepatocon ™, por outro lado, é um sistema para a cultura de hepatócitos humanos primários de aderente congelado no meio Hepatocon ™. Depois de ressuscitar o humano primárioHepatócitosS, o ensaio de administração de medicamentos foi realizado após 3 dias de cultura apenas no meio Hepatocon ™, e o tempo subsequente da administração, o sistema de cultura e a metodologia de ensaio eram os mesmos do sistema Hepatomax ™.
Enquanto isso, para garantir a precisão e o rigor dos resultados, a iphase realizou um controle médio (célula - livre) e um controle de células estromais ao mesmo tempo, com três repetições, e os resultados mostraram que oIfase - Hepatomax ™ eIphase - hepatocon ™ Os sistemas produziram uma forte resposta de pico de metabólito a partir do dia 3 e que ambos mostraram uma forte taxa de rotatividade metabólica.
- (2) o metabolismo de drogas depende principalmente do hepatócitoCYP450O sistema enzimático e sua atividade podem ser medidos para melhorar melhor.
OIfase - Hepatomax ™ eIphase - hepatocon ™ Os sistemas têm boa aplicabilidade.
A iphase configurou quatro categorias de controle médio (sem células), Hepatomax ™, Hepatocon ™ e células estromais. Usando parede - humano primário aderenteHepatócitoss Como exemplo, o metabólito aumenta os valores deCYP1A2, CYP2B6eCYP3A4foram verificados no dia 0, 3 e 7 depoisHepatócitosRecuperação por 3 dias usando finasterida, bupropiona e midazolam como substratos, respectivamente. Os valores de aumento do metabólito mostraram que ambosIfase - Hepatomax ™ eIphase - hepatocon ™ Os sistemas mostraram atividade enzimática ativa no dia 7, promovendo consistentemente o metabolismo do medicamento normal.
- (3) Além da validação da atividade enzimática, a boa estabilidade metabólica também é uma etapa importante e indispensável para validar a utilidade dos modelos in vitro.
A iPhase criou três categorias de células Hepatomax ™, Hepatocon ™ e estroma para determinar a estabilidade metabólica da tolbutimida por um período de 80 horas usando hepatócitos humanos primários aderentes como exemplo, que foram administrados 3 dias após a ressuscitação do primárioHepatócitoss, e os resultados mostraram que tanto oIfase - Hepatomax ™ eIphase - hepatocon ™ Os sistemas mostraram atividade robusta de depuração metabólica dentro do valor mais longo do tempo de ensaio.
Em resumo, a ifase, como líder em bio - reagentes in vitro, desenvolveuIphase hepatomax ™ eIphase hepatocon ™ Modelos in vitro baseados na parede - Aplicado primário, macaco, canino, rato e mouseHepatócitoscélulas S e estromais de vários gêneros, com excelente rotatividade metabólica, atividades de enzimas ativas e poderosas atividades de liberação metabólica, que oferecem novas opções para nossos clientes desenvolverem drogas baixas - liberação de medicamentos e são um parceiro indispensável para obter descoberta de medicamentos! OIphase hepatomax ™ eIphase hepatocon ™ Os modelos in vitro oferecem excelentes taxas de rotatividade metabólica, atividades de enzimas ativas e fortes atividades de liberação metabólica, fornecendo novas opções para os clientes desenvolverem drogas baixas - medicamentos de liberação e são um parceiro importante na descoberta de medicamentos!
Referência:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [j]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, TRAPA P, Obach R S, et al. Um novo método de relé para determinar baixos valores de depuração [j]. Metabolismo e disposição de drogas, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Hora da postagem: 2024 - 07 - 19 17:20:41