Deoarece activitățile enzimei metabolizante a medicamentului scad treptat odată cu prelungirea timpului de incubație in vitro, modelele tradiționale de metabolism in vitro au limitări precum timpul scurt de incubație, conversia metabolică scăzută și limita mare de detectare (limita cantitativă mai mică a testului Clint este de 2,5 μL /(min · 106 celule), care nu poate previziona cu 2,5 μL /(celulele minime de 106 celule), care nu poate previziona previziunea CLINT de lent de metabolizat de lent de droguri metabolizate de lent de metabolizat de lent de droguri de metabolizat lent de droguri lente de droguri de metabolizat lent de lent de droguri metabolizate de lent[1]. Între timp,HepatocitS au mai multe enzime necesare pentru reacții de oxidare, reducere, hidroliză și dimerizare în comparație cuMicrosomi hepaticiși în sisteme in vitro, multe modele noi tind să fie optimizate pe bazaHepatocit sistemul și imită în continuare mediul in vivo pentru a prelungi retenția activității enzimelor înHepatocits, și prelungirea timpului de incubație oferă posibilitatea de a monitoriza transformarea metabolică suficientă a medicamentelor cu metabolizare lentă[1,2].
Având în vedere acest lucru, ifaza, ca lider în reactivii biologici pentru cercetarea in vitro, a fost pionier în sistemul Hepatomax ™ și sistemul Media Hepatocon ™ bazat pe studiul hepatocitelor primare aderente și celulele stromale ale diferitelor genuri, inclusiv uman, maimuță, canină, șobolan și mouse, etc.HepatocitS ca exemplu, și ambele sisteme au fost create pentru determinarea activității și a stabilității metabolice a tipurilor de enzime specifice și creșterea valorii de răspuns a metaboliților medicamentului tolbutamidă la 10 zile și 7 zile pentru a verifica sistemele. Valoarea de răspuns la creșterea metabolitului la 10 zile și activitatea și stabilitatea metabolică a tipurilor de enzime specifice la 7 zile au fost determinate pentru a valida sistemele.
- (1) Cele două procese sistematice de cultură de validare a medicamentelor sunt următoarele:
IPhase - Hepatomax ™este un sistem de cultură de co - Hepatocitele umane primare au fost resuscitate și incubate cu celule stromale în mediu Hepatop ™ timp de 3 zile pentru a începe testul de administrare a medicamentului, iar metabolismul medicamentului a fost efectuat în seric - fără hepatodo ™, care a fost completat doar cu medicamentul fără a schimba mediul. Un total de 4, 72, 168 și 240 de ore de la administrarea de medicamente, valoarea adăugată a metaboliților medicamentelor a fost determinată pentru analiză.
IPhase - Hepatocon ™, pe de altă parte, este un sistem pentru cultivarea hepatocitelor umane primare adice congelate în mediu Hepatocon ™. După resuscitarea omului primarHepatocitS, Testul de administrare a medicamentelor a fost efectuat după 3 zile de cultură doar în mediu Hepatocon ™, iar timpul ulterior de administrare, sistemul de cultură și metodologia de analiză au fost aceleași cu cele ale sistemului Hepatomax ™.
Între timp, pentru a asigura exactitatea și rigoarea rezultatelor, ifaza a efectuat un control mediu (celulă - liberă) și un control al celulelor stromale în același timp, cu trei replici, iar rezultatele au arătat că ceiIPhase - Hepatomax ™ şiIPhase - Hepatocon ™ Sistemele au produs un răspuns puternic al metabolitului de vârf începând cu ziua a 3 -a și că amândoi au arătat o rată de cifră metabolică puternică.
- (2) Metabolismul medicamentului depinde în principal de hepatociteCYP450Sistemul enzimatic și activitatea sa poate fi măsurată pentru a examina mai bine.
IPhase - Hepatomax ™ şiIPhase - Hepatocon ™ Sistemele au o aplicabilitate bună.
Ifaza a înființat patru categorii de control mediu (fără celule), Hepatomax ™, Hepatocon ™ și celule stromale. Folosind perete - uman primar aderentHepatocitS ca exemplu, metabolitul crește valorileCYP1A2, CYP2B6şiCYP3A4au fost verificate în ziua 0, 3 și 7 dupăHepatocitRecuperare timp de 3 zile folosind finasteridă, bupropion și, respectiv, midazolam, respectiv substraturile. Valorile creșterii metabolitelor au arătat că ambeleIPhase - Hepatomax ™ şiIPhase - Hepatocon ™ Sistemele au arătat activitate enzimatică activă până în ziua 7, promovând constant metabolismul normal al medicamentului.
- (3) Pe lângă validarea activității enzimelor, o bună stabilitate metabolică este, de asemenea, un pas important și indispensabil în validarea utilității modelelor in vitro.
Ifaza a înființat trei categorii de celule Hepatomax ™, Hepatocon ™ și Stromale pentru a determina stabilitatea metabolică a tolbutimidei pe o perioadă de 80 de ore folosind ca exemplu hepatocite umane primare aderente, care au fost administrate la 3 zile după reanimarea primarăHepatocits, iar rezultatele au arătat că atâtIPhase - Hepatomax ™ şiIPhase - Hepatocon ™ Ambele sisteme au prezentat o activitate de clearance metabolică robustă în cea mai lungă valoare a timpului de analiză.
În rezumat, iPhase, ca lider în reactivi in vitro bio -IPhase Hepatomax ™ şiIPhase Hepatocon ™ Modele in vitro bazate pe perete - aplicate uman primar, maimuță, canină, șobolan și șoareceHepatocitS și celule stromale ale diferitelor genuri, cu o cifră de afaceri metabolică excelentă, activități enzime active și activități puternice de autorizare metabolică, care oferă noi alegeri pentru clienții noștri să dezvolte droguri scăzute -IPhase Hepatomax ™ şiIPhase Hepatocon ™ Modelele in vitro oferă rate excelente de cifră de afaceri metabolică, activități enzimatice active și activități puternice de autorizare metabolică, oferind noi opțiuni pentru clienți să dezvolte droguri scăzute - Clearance și sunt un partener important în descoperirea drogurilor!
Referinţă:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S și colab. O nouă metodă de releu pentru determinarea valorilor scăzute - Clearance [J]. Metabolismul și dispoziția medicamentelor, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Ora post: 2024 - 07 - 19 17:20:41