Pretože aktivity enzýmov metabolizujúce liečivo postupne klesajú s predĺžením inkubačnej doby in vitro, tradičné modely metabolizmu in vitro majú obmedzenia, ako je krátka inkubačná doba, nízka metabolická konverzia a vysoká nižšia limit detekcie (kvantitatívna dolná hranica CLINT testu 2,5 μl /(Min · 106 buniek))[1]. Medzitým,hepatocytS má viac enzýmov potrebných na reakcie na oxidáciu, redukciu, hydrolýzu a dimerizáciu v porovnaní spečeňové mikrozómy, a v in vitro systémoch, mnoho nových modelov má tendenciu byť optimalizovaných na základehepatocyt systém a ďalej napodobňovať prostredie in vivo na predĺženie retencie enzýmovej aktivity vhepatocytS a predĺženie času inkubácie poskytuje možnosť monitorovať dostatočnú metabolickú transformáciu pomalých metabolizujúcich liekov[1,2].
Vzhľadom na to, IPHASE, ako líder v oblasti biologických činidiel pre výskum in vitro, priekopníkom v systéme Hepatomax ™ a HepatoCon ™ Media založený na štúdiu adherentných primárnych hepatocytov a Stromalových buniek s rôznymi ľudskými, psmi, potkanmi a systémami Adhexax ™ s humánnymi, ktorí boli vyvinutý ľudskými, psmi a myšou, atď.hepatocytS ako príklad a oba systémy boli stanovené na stanovenie aktivity a metabolickej stability špecifických typov enzýmov a zvýšenie hodnoty odozvy metabolitov liečiva Tolbutamid po 10 dňoch a 7 dní na overenie systémov. Metabolit zvyšuje hodnotu odozvy po 10 dňoch a aktivita a metabolická stabilita špecifických typov enzýmov po 7 dňoch bola stanovená na overenie systémov.
- (1) Dva systematické procesy kultúry validácie liekov sú nasledujúce:
Iphase - Hepatomax ™je co - kultivačný systém zmrazených primárnych ľudských hepatocytov a stromálnych buniek. Primárne ľudské hepatocyty boli resuscitné a inkubované so stromálnymi bunkami v médiu Hepatop ™ na 3 dni na začatie testu podania liečiva a metabolizmus liečiva sa uskutočňoval v médiu Sérum - Free Hepatodo ™, ktoré bolo doplnené iba s liečivom bez toho, aby sa zmenili médium. Celkovo 4, 72, 168 a 240 hodín po podaní liečiva bola stanovená hodnota metabolitov liečiva na analýzu.
Iphase - Hepatocon ™, na druhej strane, je systém na kultiváciu zmrazených adherentných primárnych ľudských hepatocytov v médiu Hepatocon ™. Po resuscitácii primárneho človekahepatocytS, test podávania liečiv sa uskutočnil po 3 dňoch kultúry v médiu Hepatocon ™ iba a následný čas podania, kultivačný systém a metodika testov boli rovnaké ako v systéme Hepatomax ™.
Medzitým, aby sa zabezpečila presnosť a prísnosť výsledkov, IPHASE vykonala médium kontroly (bez buniek) a kontrola stromálnych buniek súčasne s tromi replikáciami a výsledky ukázali, žeIphase - Hepatomax ™ aIphase - Hepatocon ™ Systémy vyvolali silnú maximálnu metabolitovú reakciu od 3. dňa a že obaja vykazovali silnú mieru metabolického obratu.
- (2) Metabolizmus liekov je závislý hlavne od hepatocytuCYP450Enzýmový systém a jeho aktivita je možné merať na lepšie preskúmanie.
TenIphase - Hepatomax ™ aIphase - Hepatocon ™ Systémy majú dobrú použiteľnosť.
Iphase nastavuje štyri kategórie strednej kontroly (bez buniek), Hepatomax ™, Hepatocon ™ a stromálne bunky. Používanie steny - adherent primárneho človekahepatocyts ako príklad, metabolit zvyšuje hodnotyCYP1A2, Cyp2b6aCYP3A4boli overené v deň 0, 3 a 7hepatocytZotavenie po dobu 3 dní pomocou finasteridu, bupropiónu a midazolamu ako substrátov. Hodnoty zvýšenia metabolitu ukázali, že obojeIphase - Hepatomax ™ aIphase - Hepatocon ™ Systémy vykazovali aktívnu aktivitu enzýmov do 7. dňa, čo neustále podporuje normálny metabolizmus liečiva.
- (3) Okrem validácie enzýmovej aktivity je dobrá metabolická stabilita tiež dôležitým a nevyhnutným krokom pri overení užitočnosti modelov in vitro.
IPHASE zriadila tri kategórie buniek Hepatomax ™, HepatoCon ™ a stromálnych buniek na stanovenie metabolickej stability tolbutimidu počas 80 hodín s použitím adherentných primárnych ľudských hepatocytov ako príkladu, ktoré sa podali 3 dni po resuscitácii primárnej primárnej ľudskejhepatocyts a výsledky ukázali, že obidveIphase - Hepatomax ™ aIphase - Hepatocon ™ Systémy vykazovali robustnú aktivitu metabolického klírensu v rámci najdlhšej hodnoty času testu.
Stručne povedané, IPHASE, ako líder v bio -reagenciách in vitroIphase Hepatomax ™ aIphase Hepatocon ™ Modely in vitro založené na stene - aplikovanej primárnej ľudskej, opice, psie, potkanov a myšihepatocytS a stromálne bunky rôznych rodov, s vynikajúcim metabolickým obratom, aktívnymi enzýmovými aktivitami a výkonnými aktivitami metabolického klírensu, ktoré ponúkajú našim zákazníkom nové možnosti na rozvoj nízkeho - klírensu a sú nevyhnutným partnerom na realizáciu objavu liekov! TenIphase Hepatomax ™ aIphase Hepatocon ™ Modely in vitro ponúkajú vynikajúcu mieru metabolického obratu, aktívne enzýmové aktivity a silné aktivity metabolického klírensu, poskytujú zákazníkom nové možnosti na vývoj nízkeho - klírensu a sú dôležitým partnerom pri objavovaní liekov!
Odkaz:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [j]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach RS, a kol. Nová metóda relé na stanovenie nízkych - klírensových hodnôt [j]. Drogový metabolizmus a dispozícia, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Čas príspevku: 2024 - 07 - 19 17:20:41