Meqenëse aktivitetet e enzimës metabolizuese të drogës gradualisht ulen me zgjatjen e kohës së inkubacionit in vitro, modelet tradicionale të metabolizmit in vitro kanë kufizime të tilla si koha e inkubacionit të shkurtër, konvertimi i ulët metabolik dhe kufiri i lartë i poshtëm i zbulimit (kufiri sasior i ulët i clint është 2.5 μl /(min · 106 qeliza)), të cilat nuk mund të parashikojnë saktësisht clint të drogës ngadalë metabolizues[1]. Ndërkohë,hepatocitets kanë më shumë enzima të nevojshme për oksidimin, zvogëlimin, hidrolizën dhe reaksionet e dimerizimit në krahasim memikrosomet e mëlçisë, dhe në sistemet in vitro, shumë modele të reja kanë tendencë të optimizohen bazuar nëhepatocitet sistemi dhe imitoni më tej mjedisin in vivo për të zgjatur mbajtjen e aktivitetit të enzimës nëhepatocitetS, dhe zgjatja e kohës së inkubacionit siguron mundësinë për të monitoruar transformimin e mjaftueshëm metabolik të ilaçeve të ngadalta metabolizuese[1,2].
Duke pasur parasysh këtë, iPhase, si një udhëheqës në reagentët biologjikë për hulumtime in vitro, ka pionieruar sistemin Hepatomax dhe sistemin e mediave Hepatocon bazuar në studimin e hepatociteve parësore të hepatociteve dhe qelizave të ndryshme të gjinisë, duke përfshirë sistemin e njeriut, kanine, kanine, rat, rat, etj. i njeriuthepatocitetS si një shembull, dhe të dy sistemet u vendosën për përcaktimin e aktivitetit dhe qëndrueshmërinë metabolike të llojeve specifike të enzimave dhe rritjen e vlerës së përgjigjes së metabolitëve të tolbutamidit të drogës në 10 ditë dhe 7 ditë për të verifikuar sistemet. Metaboliti i rritjes së vlerës së përgjigjes në 10 ditë dhe aktiviteti dhe qëndrueshmëria metabolike e llojeve specifike të enzimave në 7 ditë u përcaktuan për të vërtetuar sistemet.
- (1) Dy proceset sistematike të kulturës së vlefshmërisë së ilaçeve janë si më poshtë:
IPhase - Hepatomaxështë një sistem kulturor i hepatociteve parësore të ngrira të njeriut dhe qelizave stromale. Hepatocitet parësore të njeriut u ringjallën dhe u inkubuan me qelizat stromale në mediumin Hepatop ™ për 3 ditë për të filluar analizën e administrimit të ilaçeve, dhe metabolizmi i drogës u krye në serum - Medium Hepatodo falas, i cili u rimbush vetëm me ilaçin pa ndryshuar mediumin. Një total prej 4, 72, 168 dhe 240 orë pas administrimit të ilaçeve, vlera e shtuar e metabolitëve të drogës u përcaktua për analiza.
IPhase - Hepatocon, nga ana tjetër, është një sistem për të kultivuar hepatocitet parësore të ngrira të njeriut aderues në mediumin Hepatocon. Pas ringjalljes së njeriut kryesorhepatocitetS, analiza e administrimit të ilaçeve u krye pas 3 ditësh të kulturës në Hepatocon ™ Medium, dhe koha pasuese e administrimit, sistemi i kulturës dhe metodologjia e vlerësimit ishin të njëjta me ato të sistemit Hepatomax.
Ndërkohë, për të siguruar saktësiIPhase - Hepatomax dheIPhase - Hepatocon Sistemet prodhuan një përgjigje të fortë të metabolitit të pikut nga dita 3 e tutje, dhe se ata të dy treguan një shkallë të fortë të qarkullimit metabolik.
- (2) metabolizmi i drogës varet kryesisht nga hepatocitiCYP450Sistemi i enzimës, dhe aktiviteti i tij mund të matet për të ekzaminuar më mirë.
IPhase - Hepatomax dheIPhase - Hepatocon Sistemet kanë zbatueshmëri të mirë.
IPhase vendosi katër kategori të kontrollit të mesëm (pa qeliza), Hepatomax ™, Hepatocon ™ dhe qelizat stromale. Përdorimi i murit - njeriu parësor aderueshepatocitetsi shembull, metaboliti rrit vlerat eCYP1A2, CYP2B6dheCyp3a4u verifikuan në ditën 0, 3 dhe 7 pashepatocitetRimëkëmbja për 3 ditë duke përdorur finasteride, bupropion dhe midazolam si substrate, përkatësisht. Vlerat e rritjes së metabolitit treguan se të dyjaIPhase - Hepatomax dheIPhase - Hepatocon Sistemet treguan aktivitet aktiv të enzimës deri në ditën 7, duke promovuar vazhdimisht metabolizmin normal të ilaçeve.
- (3) Përveç vlefshmërisë së aktivitetit të enzimës, stabiliteti i mirë metabolik është gjithashtu një hap i rëndësishëm dhe i domosdoshëm në vërtetimin e dobisë së modeleve in vitro.
IPhase vendosi tre kategori të qelizave Hepatomax ™, Hepatocon ™ dhe stromale për të përcaktuar stabilitetin metabolik të tolbutimidit gjatë një periudhe prej 80 orësh duke përdorur hepatocitet parësore të njeriut aderues si shembull, të cilat u administruan 3 ditë pas ringjalljes së fillimithepatocitets, dhe rezultatet treguan se të dyjaIPhase - Hepatomax dheIPhase - Hepatocon Të dy sistemet treguan aktivitet të fortë të pastrimit metabolik brenda vlerës më të gjatë të kohës së provës.
Si përmbledhje, iPhase, si udhëheqës në bio in vitro - reagentët, është zhvilluarIPhase Hepatomax dheIPhase Hepatocon Modelet in vitro bazuar në mur - të aplikuara parësore njerëzore, majmun, qen, miu dhe miunhepatocitetS dhe qelizat stromale të gjinive të ndryshme, me qarkullim të shkëlqyeshëm metabolik, aktivitete aktive enzimë dhe aktivitete të fuqishme të pastrimit metabolik, të cilat ofrojnë zgjedhje të reja për klientët tanë për të zhvilluar ilaçe të ulëta - pastrim, dhe janë një partner i domosdoshëm për të realizuar zbulimin e drogës!IPhase Hepatomax dheIPhase Hepatocon Modelet in vitro ofrojnë norma të shkëlqyera të qarkullimit metabolik, aktivitete aktive të enzimës dhe aktivitete të forta të pastrimit metabolik, duke siguruar mundësi të reja për klientët që të zhvillojnë ilaçe të ulëta - pastrim dhe janë një partner i rëndësishëm në zbulimin e drogës!
Referenca:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Një metodë e romanit për përcaktimin e vlerave të ulëta - të pastrimit [J]. Metabolizmi dhe disponimi i drogës, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Koha e postimit: 2024 - 07 - 19 17:20:41