رواية في نموذج استقلاب خلايا الكبد المختبري يسهل بطيئًا - استقلاب الدراسات الدوائية

نظرًا لأن أنشطة إنزيم استقلاب الأدوية تنخفض تدريجياً مع إطالة وقت الحضانة في المختبر ، فإن نماذج التمثيل الغذائي التقليدية في المختبر لها قيود مثل وقت الحضانة القصير ، والتحويل الأيضي المنخفض والحد الأدنى العالي للكشف (الحد الأدنى الكمي لمقاس كلينت هو 2.5 ميكرولتر^[1]. في أثناء،خلايا الكبدS لها المزيد من الإنزيمات المطلوبة للأكسدة ، والخفض ، والتحلل المائي ، والتفاعلات الدائرية مقارنة بتفاعلاتالكبد microsomesوفي الأنظمة المختبرية ، تميل العديد من النماذج الجديدة إلى تحسينها بناءً علىخلايا الكبد النظام ويحاكي بيئة في الجسم الحي لإطالة الاحتفاظ بنشاط الإنزيم فيخلايا الكبدS ، ويوفر إطالة وقت الحضانة إمكانية مراقبة التحول الأيضي الكافي للأدوية البطيئة الاستقلاب^[1،2].

في ضوء ذلك ، فإن iPhase ، كقائد في الكواشف البيولوجية للبحوث المختبرية ، كان رائدًا في نظام الوسائط الكبدي ™ ونظام Hepatocon ™ استنادًا إلى دراسة الخلايا الكبدية الأولية الملتصقة والخلايا البشرية التي تم تطويرها في نظام البشر.خلايا الكبدعلى سبيل المثال ، تم إعداد كلا النظامين لتحديد النشاط والاستقرار الأيضي لأنواع إنزيم محددة والزيادة في قيمة استجابة المستقلبات في تولبوتاميد الدواء في 10 أيام و 7 أيام للتحقق من الأنظمة. تم تحديد قيمة الاستجابة لزيادة المستقلب في 10 أيام والنشاط والاستقرار الأيضي لأنواع إنزيم محددة في 7 أيام تم تحديدها للتحقق من صحة الأنظمة.

• (1) اثنين من عمليات ثقافة التحقق من المخدرات المنهجية هي كما يلي:

  iphase - Hepatomax ™هو نظام ثقافة CO - لخلايا الكبد البشرية الابتدائية والخلايا اللحمية. تم إنعاش الخلايا الكبدية البشرية الأولية وحضنتها بالخلايا اللحمية في وسط الكبد ™ لمدة 3 أيام لبدء اختبار إدارة المخدرات ، وتم تنفيذ عملية التمثيل الغذائي للدواء في المصل - الوسيلة الحرة Hepatodo ™ ، والتي تم تجديدها فقط مع الدواء دون تغيير الوسط. ما مجموعه 4 و 72 و 168 و 240 ساعة بعد إدارة المخدرات ، تم تحديد قيمة مستقلبات المخدرات للتحليل.

 

  iphase - Hepatocon ™، من ناحية أخرى ، هو نظام لتربية خلايا الكبد البشرية الابتدائية الملتوية في وسط الكبد ™. بعد إنعاش الإنسان الأساسيخلايا الكبدS ، تم إجراء اختبار إدارة المخدرات بعد 3 أيام من الثقافة في وسط الكبد ™ وحده ، والوقت اللاحق للإدارة ، ونظام الثقافة ومنهجية الفحص كانت هي نفس نظام Hepatomax ™.

 

وفي الوقت نفسه ، لضمان دقة وصرامة النتائج ، أجرى Iphase تحكمًا متوسطًا (خلية - خالية) والتحكم في الخلايا اللحمية في نفس الوقت ، مع ثلاث نسخ متماثلة ، وأظهرت النتائج أنiphase - Hepatomax ™ وiphase - Hepatocon ™ أنتجت الأنظمة استجابة قوية للأيض من اليوم الثالث فصاعدا ، وأن كلاهما أظهر معدل دوران قوي.

 

 

• (2) استقلاب المخدرات يعتمد بشكل أساسي على خلايا الكبدCYP450نظام الإنزيم ، ويمكن قياس نشاطه لفحص أفضل.

الiphase - Hepatomax ™ وiphase - Hepatocon ™ الأنظمة لها قابلية تطبيق جيدة.

قام Iphase بإعداد أربع فئات من التحكم المتوسط ​​(بدون خلايا) ، Hepatomax ™ و Hepatocon ™ والخلايا اللحمية. باستخدام الحائط - الإنسان الابتدائي الملتصقخلايا الكبدعلى سبيل المثال ، يزيد المستقلب من قيمCYP1A2, CYP2B6وCYP3A4تم التحقق منه في اليوم 0 و 3 و 7 بعدخلايا الكبدالاسترداد لمدة 3 أيام باستخدام Finasteride و Bupropion و Midazolam كركائز ، على التوالي. أظهرت قيم زيادة المستقلب أن كلاهماiphase - Hepatomax ™ وiphase - Hepatocon ™ أظهرت الأنظمة نشاط إنزيم نشط بحلول اليوم 7 ، مما يعزز باستمرار استقلاب الأدوية الطبيعي.

 

• (3) بالإضافة إلى التحقق من نشاط الإنزيم ، يعد استقرار التمثيل الغذائي الجيد أيضًا خطوة مهمة ولا غنى عنها في التحقق من فائدة النماذج المختبرية.

قام Iphase بإعداد ثلاث فئات من Hepatomax ™ و Hepatocon ™ والخلايا اللحمية لتحديد استقرار التمثيل الغذائي لـ Tolbutimide على مدى فترة 80 ساعة باستخدام خلايا الكبد البشرية الأولية الملتصقة كمثال ، والتي كانت تدار 3 أيام بعد إنعاش الأساسيات الأوليةخلايا الكبدs ، وأظهرت النتائج أن كلا منiphase - Hepatomax ™ وiphase - Hepatocon ™ أظهر كلاهما نشاطًا قويًا للتخليص الأيضي ضمن أطول قيمة لوقت الفحص.

 

باختصار ، تطور Iphase ، كقائد في الكواشف الحيوية في المختبر ،iphase Hepatomax ™ وiphase Hepatocon ™ في النماذج المختبرية القائمة على الجدار - الإنسان الأساسي ، القرد ، الكلاب ، الفئران والماوسخلايا الكبدS والخلايا اللحمية من مختلف الأجناس ، مع دوران الأيض الممتاز ، وأنشطة الإنزيم النشط وأنشطة التخليص الأيضية القوية ، والتي توفر خيارات جديدة لعملائنا لتطوير أدوية منخفضة - التخليص ، وهي شريك لا غنى عنه لتحقيق اكتشاف المخدرات! الiphase Hepatomax ™ وiphase Hepatocon ™ في النماذج المختبرية ، توفر معدلات دوران التمثيل الغذائي الممتازة ، وأنشطة الإنزيم النشط وأنشطة التخليص الأيضية القوية ، وتوفير خيارات جديدة للعملاء لتطوير أدوية منخفضة - ، وهي شريك مهم في اكتشاف المخدرات!

 

مرجع:

[1] 阮婷婷 ، 鞠武建 ، 熊海伟 ، 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报 ، 2019 (2): 152 - 160.

[2] Di L ، Trapa P ، Obach R S ، et al. طريقة ترحيل جديدة لتحديد قيم الخلوص المنخفضة [J]. استقلاب المخدرات والتخلص منها ، 2012 ، 40 (9): 1860 - 1865.