Aangezien het medicijn enzymactiviteiten geleidelijk afnemen met de verlenging van de in vitro incubatietijd, hebben traditionele in vitro metabolismemodellen beperkingen zoals korte incubatietijd, lage metabole conversie en hoge lagere limiet van detectie (de kwantitatieve ondergrens van Clint -test is 2,5 μl /(Min (Min (Min (Min (Min (Min (Min van 106 cellen)) 2,5 μl /(Min (Min (Min (Min (Min (Min (Min van 106 Cellen)), een Clint van de langzaam gemetaboliseerde drugs.[1]. In de tussentijd,hepatocyts hebben meer enzymen vereist voor oxidatie, reductie, hydrolyse en dimeratiereacties in vergelijking metLevermicrosomen, en in in vitro systemen zijn veel nieuwe modellen meestal geoptimaliseerd op basis van dehepatocyt systeem en nabootsen van de in vivo omgeving om de behoud van enzymactiviteit in te verlengen inhepatocytS, en de verlenging van de incubatietijd biedt de mogelijkheid om voldoende metabole transformatie van langzaam metaboliserend geneesmiddelen te volgen[1,2].
Met het oog hierop heeft iPhase, als leider in biologische reagentia voor in vitro onderzoek, het Hepatomax ™ -systeem en het Hepatocon ™ -mediasysteem ontwikkeld op basis van de studie van adherente primaire hepatocyten en stromale cellen van verschillende geslachten, ratten, ratten, ratten, ratten, ratten, ratten, ratten, ratten en muis, enz.hepatocytS als voorbeeld, en beide systemen werden opgezet voor de bepaling van de activiteit en metabole stabiliteit van specifieke enzymtypen en de toename van de responswaarde van metabolieten van het medicijntolbutamide na 10 dagen en 7 dagen om de systemen te verifiëren. Metaboliet verhoogt de responswaarde na 10 dagen en activiteit en metabole stabiliteit van specifieke enzymtypen na 7 dagen werden bepaald om de systemen te valideren.
- (1) De twee systematische drugsvalidatiecultuurprocessen zijn als volgt:
IPhase - Hepatomax ™is een co - kweeksysteem van bevroren ommuurde primaire menselijke hepatocyten en stromale cellen. Primaire menselijke hepatocyten werden gereanimeerd en gedurende 3 dagen geïncubeerd met stromale cellen in Hepatop ™ -medium om de Assay van het geneesmiddeltoediening te starten, en het metabolisme van het medicijn werd uitgevoerd in serum - Free Hepatodo ™ -medium, dat alleen met het medicijn werd aangevuld zonder het medium te veranderen. Een totaal van 4, 72, 168 en 240 uur na toediening van geneesmiddelen werd de toegevoegde waarde van medicijnmetabolieten bepaald voor analyse.
IPhase - Hepatocon ™, aan de andere kant, is een systeem voor het kweken van bevroren hechtende primaire menselijke hepatocyten in Hepatocon ™ Medium. Na het reanimeren van de primaire menshepatocytS werd de Assay Drug Administration uitgevoerd na 3 dagen van cultuur in Hepatocon ™ alleen, en de daaropvolgende tijdstip van toediening, het cultuursysteem en de testmethode waren dezelfde als die van het Hepatomax ™ -systeem.
Ondertussen, om de nauwkeurigheid en strengheid van de resultaten te waarborgen, voerde iPhase een gemiddelde controle (cel - vrij) en een stromale celregeling tegelijkertijd, met drie replicaties, en de resultaten toonden aan dat de resultatenIPhase - Hepatomax ™ EnIPhase - Hepatocon ™ Systemen produceerden vanaf dag 3 een sterke piekmetabolietrespons en dat ze allebei een sterke metabole omzetsnelheid vertoonden.
- (2) Drugsmetabolisme is voornamelijk afhankelijk van de hepatocytenCYP450Enzymsysteem en de activiteit ervan kunnen worden gemeten om beter te onderzoeken.
DeIPhase - Hepatomax ™ EnIPhase - Hepatocon ™ Systemen hebben een goede toepasbaarheid.
IPhase heeft vier categorieën gemiddelde controle (geen cellen), Hepatomax ™, Hepatocon ™ en stromale cellen opgezet. Muur gebruiken - Herende primaire menshepatocytS als een voorbeeld, de metaboliet verhoogt waarden vanCYP1A2, CYP2B6EnCYP3A4werden geverifieerd op dag 0, 3 en 7 daarnahepatocytHerstel gedurende 3 dagen met respectievelijk finasteride, bupropion en midazolam als de substraten. Metabolietverhoogwaarden toonden aan dat beideIPhase - Hepatomax ™ EnIPhase - Hepatocon ™ Systemen vertoonden actieve enzymactiviteit op dag 7, die consequent het normale metabolisme van geneesmiddelen bevorderen.
- (3) Naast de validatie van enzymactiviteit is een goede metabole stabiliteit ook een belangrijke en onmisbare stap bij het valideren van het nut van in vitro modellen.
IPhase heeft drie categorieën Hepatomax ™, Hepatocon ™ en stromale cellen opgezet om de metabole stabiliteit van tolbutimide gedurende een periode van 80 uur te bepalen met behulp van heimelijke primaire menselijke hepatocyten als een voorbeeld, die 3 dagen na reanimatie werden toegediend,hepatocyts, en de resultaten toonden aan dat zowel deIPhase - Hepatomax ™ EnIPhase - Hepatocon ™ Systemen beide vertoonden een robuuste metabole klaringactiviteit binnen de langste waarde van de testtijd.
Samenvattend heeft iPhase, als leider in in vitro bio - reagentia, ontwikkeldIPhase Hepatomax ™ EnIPhase Hepatocon ™ In vitro modellen gebaseerd op wand - Applied primaire mens, aap, honden, ratten en muishepatocytS en stromale cellen van verschillende geslachten, met uitstekende metabole omzet, actieve enzymactiviteiten en krachtige metabole klaringactiviteiten, die nieuwe keuzes bieden voor onze klanten om lage - opruiming te ontwikkelen, en zijn een onmisbare partner om drugsontdekking te realiseren! DeIPhase Hepatomax ™ EnIPhase Hepatocon ™ In vitro -modellen bieden uitstekende metabole omzetpercentages, actieve enzymactiviteiten en sterke metabole opruimingsactiviteiten, die nieuwe opties bieden voor klanten om medicijnen met lage - goedkeuring te ontwikkelen en zijn een belangrijke partner in het ontdekken van geneesmiddelen!
Referentie:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Een nieuwe relaismethode voor het bepalen van lage - klaringwaarden [J]. Drugsmetabolisme en dispositie, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Posttijd: 2024 - 07 - 19 17:20:41